睡眠呼吸暂停模式间歇低氧的程度及频率对白介素6及白介素8的影响

发布时间：2020-07-06 13:35

【摘要】： 目的探讨睡眠呼吸暂停模式间歇低氧不同程度及频率对炎性反应的影响及相应的规律。从而为睡眠呼吸暂停综合征(Sleep Apnea Syndrome, SAS)及其心脑血管合并症的炎性机制提供实验数据和理论依据。 方法实验分为两大部分。 第一部分：将人脐静脉内皮细胞可传代细胞株ECV304置于细胞培养舱,以模拟睡眠呼吸暂停(Sleep Apnea, SA)模式低氧／再氧合模式,将舱内气体由计算机程控为不同程度与频率间歇低氧(Intermittent Hypoxia, IH)环境。细胞株分为1个持续正常氧(对照组)和18个实验组。不同IH程度分3组,频率固定为12次／h,即IH程度组1(10%02)、IH程度组2(1.5%02)及IH程度组3(0.5%O2组)。每一不同IH程度组分别设立不同IH频率5组,共15组。频率组1(40次／h)；频率组2(20次／h)；频率组3(12次／h)；频率组4(9.23次／h)和频率组5(6.32次／h)。细胞暴露后以酶联免疫吸附法(Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay, ELISA)测定培养液中白细胞介素(Interleukin-6, IL-6)及白细胞介素-8(Interleukin-8, IL-8)浓度。 第二部分：通过临床多导睡眠监测收集病例,设立1个正常对照组(A组)和轻度OSAS(B组)、中度OSAS(C组)、重度OSAS(D组)及重度OSAS合并高血压组(E组)4个实验组。于次日晨起睡眠监测结束后采集静脉血,以ELISA法分别测定血清中IL-6及IL-8浓度。 结果第一部分：①IL-6和IL-8水平在3个不同程度IH组均高于正常O2组(P均0.05),随IH程度加重IL-6及IL-8水平呈逐步升高趋势(P均0.05)。不同程度IH组间两两比较,差别均有统计学意义(P均0.05)。②10%02IH状态下,IL-6除IH频率组3与IH频率组4之间相比无统计学意义(P0.05)外,其余不同频率IH组间IL-6水平不同,均具有统计学差异(P均0.05)。IL-8除IH频率组1与组2、组1与组5、组2与组5、组3与组4及组4与组5两两相比无统计学意义(P0.05)外,其余不同频率IH组间IL-8水平不同,均具有统计学差异(P均0.05)。③1.5%02IH状态下,不同频率组别IL-6水平不同(P均0.05)。随着IH频率的降低,IL-6水平随之升高,至12次／h升至最高,以后随IH频率降低,IL-6水平略有下降。IL-8除IH频率组2与IH频率组5、组3与组4、组4与组5之间相比无统计学意义(P0.05)外,两两相比均具有统计学差异(P均0.05)。④0.5%O2IH状态下,随着IH频率降低IL-6及IL-8水平在20次／小时组轻度升高(P0.05),至12次／小时达最高(P0.05),9.23次／小时略下降(P0.05),6.32次／小时进一步下降(P0.05)。总体呈现随IH频率下降而渐升高而后略有下降的趋势。 第二部分：①与正常对照组(A组)比较,不同程度OSAS各组(B、C、D组)及OSAS合并高血压组(E组)IL-6、IL-8水平均增高(P0.05),具有统计学意义。②B、C、D、E各组组间两两比较,IL-6、IL-8水平差异均具有统计学意义(P均0.05)。IL-6及工L-8水平随着OSAS程度加重而增加；IL-6及IL-8在重度OSAS与重度OSAS合并高血压组间水平不同,具有统计学意义(P0.05)。 结论SA模式下间歇低氧对细胞及机体的炎性损伤是存在的,且炎性反应水平具低氧程度依赖性。轻、中、重低氧暴露下,炎性反应水平有随频率减低而增加,而后下降趋势,并非间歇低氧频率越高损伤越严重。炎性反应水平在OSAS患者中随OSAS程度加重而升高。重度OSAS合并高血压患者炎性反应水平高于重度OSAS患者。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R56
【图文】：

1.1对象和方法1.1.1细胞模型选择细胞模型选用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)可传代细胞株ECV304，细胞的可获得性及细胞自身的行为。究其因有以下三点:第一，原代细胞困难、增殖活性低、需要添加特殊的生长因子才能成活;第二，ECV304细具有原代细胞的特征，如鹅卵石样的单层生长模式，胞质内特异We1bel一Palade小体，摄取低密度脂蛋白等;第三，ECV3O4细胞增殖活力能良好的贴壁生长和多次传代。血管内皮细胞(VasC。儿rendothelialCeEC)衬在血管腔面，对于血.液中氧分压的变化非常敏感，也是氧化应激及反应的敏感器官，在体液内坏境中各种刺激下，能合成和分泌多种生物活性质。论为:ECV304与原代人脐静脉内皮细胞的细胞生理、病理学特性基本一可应用于本实验研究。ECV304细胞由天津南开大学生命科学研究院惠赠。

IH/f20X模式实验暴露装置全貌

1.5%02)而pCoZ由 152mmHg(约20%COZ)I瞬lhJ降至 38mmHg(约50， 0eoZ)时，根据实测结果绘制出厚度为 3mm的空白培养基底部气体分压相对于时间的变化曲线，见图5。卜卜 卜 入入飞 飞 八八一 一 丫丫丫 丫丫~氧分版 版~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~二氧化碳 碳一一工于玄 玄玄 分压 压三三飞街什经经经经经经经经经经经经经经 经卜 卜卜 {{{皿皿皿皿皿皿皿皿皿 .....， ， ， 月 月 月月 月 一一占工卜卜‘ _1111口口右 右右右右右右右右右右右右右 二 二二1卜 卜 2040008060206040

本文编号：2743704