香烟暴露和戒烟大鼠支气管肺泡灌洗液及外周血调节性T细胞的表达及意义
发布时间：2020-07-15 01:30
【摘要】： 目的观察香烟暴露和戒烟大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)及外周血中调节性T(Treg)细胞的表达与探讨其意义。 方法将50只健康清洁级雄性Wistar大鼠随机分为五组:12周正常对照组(A组)、24周正常对照组(B组)、12周吸烟组(C组)、戒烟组(D组)、24周吸烟组(E组)。用烟熏法复制大鼠气道炎症的动物模型。12周后,A组、C组处置取材;D组实行戒烟12周;E组继续烟熏12周。再次满12周后B组、D组和E组均处置取材。行病理学检查,HE染色下观察小气道病理改变,进行气道评分;收集BALF进行细胞学计数和分类;用酶联免疫吸附法(ELISA)法测出BALF中4种细胞因子的浓度: Th1/Th2型细胞因子IFN-γ、IL-4、促炎因子IL-8、TNF-α;用流式细胞术检测各组大鼠BALF及外周血中Foxp3+ Treg细胞的数量,用RT-PCR检测各组大鼠BALF及外周血中Foxp3 mRNA的表达。 结果(1)与正常对照组比较,12周吸烟组、戒烟组、24周吸烟组气道炎症评分明显增高(P均0.01)。与12周吸烟组相比,戒烟组、24周吸烟组两组气道炎症评分均增高(P均0.01),24周吸烟组升高最明显(P均0.01)。(2)与正常对照组相比,12周吸烟组、戒烟组、24周吸烟组BALF中IFN-γ、TNF-α和IL-8增高,IL-4减少(P均0.01)。与12周吸烟组相比,戒烟组IFN-γ、TNF-α无明显变化(P0.05),24周吸烟组增高最明显(P0.01)(3)与正常对照组相比,12周吸烟组、戒烟组、24周吸烟组BALF中Foxp3+ Treg细胞比例上升(P0.01),后三组之间BALF中Foxp3+ Treg细胞比例无明显差别(P均0.05)。各组外周血中Foxp3+ Treg细胞比例无明显差别(P均0.05)(4)与正常对照组相比,12周吸烟组、戒烟组、24周吸烟组BALF中Foxp3 mRNA表达升高(P0.01)。后三者之间BALF中Foxp3 mRNA表达无明显差别(P均0.05)。各组外周血中Foxp3 mRNA表达无明显差别(P均0.05)。 结论(1)香烟暴露致大鼠气道Th1/Tc1介导的炎症伴BALF中Treg细胞表达增高。(2)戒烟后大鼠气道炎症仍存在,但较持续香烟暴露大鼠减轻,BALF中Treg细胞表达未见下降。(3)气道内Treg细胞高表达可能与抑制气道炎症有关。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R563.9
【图文】：
图 1.实验分组及对应干预2.4 动物处置及标本采集⑴ 10%水合氯醛溶液 0.3ml/100g 腹腔麻醉。⑵ 装血的 EP 管用肝素湿润管壁。将 2 瓶 100ml 生理盐水置于 37℃预热。⑶ 将麻醉好的大鼠固定于解剖固定板。⑷ 解剖大鼠暴露股静脉，注射 1ml 肝素使其肝素化。暴露分离气管下穿过手术线备用。⑸ 股静脉采血 5ml，0.5ml 置于 1ml EP 管用于流式检测，3ml 置于 管用于 RT-PCR 检测。放置血液前将润管的肝素甩净。采血后 4℃保存⑹ 打开腹腔，另取 10ml 注射器行下腔静脉采血，尽可能将血放尽
图 2 A 图为 12 周对照组（A 组），C 图为 12 周吸烟组（C 组）。与 12 周对照组相比，可周吸烟组气管黏膜上皮纤毛倒伏，杯状细胞增多，小气道壁周围均有不同程度的炎症细胞浸润淋巴细胞为主，可见淋巴细胞聚集成团。（HE×40）图 3 B 图为 24 周对照组（B 组），D 图为戒烟组（D 组），E 图为 24 周吸烟组（E 组）。和 对照组相比，戒烟组及 24 吸烟周组气管黏膜上皮纤毛倒伏，甚至脱落，杯状细胞增多，小气道围均有不同程度的炎症细胞浸润，以淋巴细胞为主，部分可见淋巴滤泡的形成及少量的巨噬细中性粒细胞，在炎症细胞浸润明显的地方可以看到管壁平滑肌肌束断裂，排列紊乱。（HE×40）
图 3 B 图为 24 周对照组（B 组），D 图为戒烟组（D 组），E 图为 24 周吸烟组（E 组）。和 24 周对照组相比，戒烟组及 24 吸烟周组气管黏膜上皮纤毛倒伏，甚至脱落，杯状细胞增多，小气道壁周围均有不同程度的炎症细胞浸润，以淋巴细胞为主，部分可见淋巴滤泡的形成及少量的巨噬细胞和中性粒细胞，在炎症细胞浸润明显的地方可以看到管壁平滑肌肌束断裂，排列紊乱。（HE×40）图 3 C 图为 12 周吸烟组（C 组）D 图为戒烟组（D 组）E 图为 24 周吸烟组（E 组）。12 周吸烟组、戒烟组、24 周吸烟组气道炎症比较（×40）。C 可见气道旁有炎细胞浸润并聚集成团。D 可见气道周围炎细胞浸润较 C 加重，有淋巴滤泡形成，杯状细胞增多。E 较 C、D 除炎症改变更为严重外，还可见管壁平滑肌肌束断裂，排列紊乱（HE×40）。
本文编号：2755773
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R563.9
【图文】：
图 1.实验分组及对应干预2.4 动物处置及标本采集⑴ 10%水合氯醛溶液 0.3ml/100g 腹腔麻醉。⑵ 装血的 EP 管用肝素湿润管壁。将 2 瓶 100ml 生理盐水置于 37℃预热。⑶ 将麻醉好的大鼠固定于解剖固定板。⑷ 解剖大鼠暴露股静脉，注射 1ml 肝素使其肝素化。暴露分离气管下穿过手术线备用。⑸ 股静脉采血 5ml，0.5ml 置于 1ml EP 管用于流式检测，3ml 置于 管用于 RT-PCR 检测。放置血液前将润管的肝素甩净。采血后 4℃保存⑹ 打开腹腔，另取 10ml 注射器行下腔静脉采血，尽可能将血放尽
图 2 A 图为 12 周对照组（A 组），C 图为 12 周吸烟组（C 组）。与 12 周对照组相比，可周吸烟组气管黏膜上皮纤毛倒伏，杯状细胞增多，小气道壁周围均有不同程度的炎症细胞浸润淋巴细胞为主，可见淋巴细胞聚集成团。（HE×40）图 3 B 图为 24 周对照组（B 组），D 图为戒烟组（D 组），E 图为 24 周吸烟组（E 组）。和 对照组相比，戒烟组及 24 吸烟周组气管黏膜上皮纤毛倒伏，甚至脱落，杯状细胞增多，小气道围均有不同程度的炎症细胞浸润，以淋巴细胞为主，部分可见淋巴滤泡的形成及少量的巨噬细中性粒细胞，在炎症细胞浸润明显的地方可以看到管壁平滑肌肌束断裂，排列紊乱。（HE×40）
图 3 B 图为 24 周对照组（B 组），D 图为戒烟组（D 组），E 图为 24 周吸烟组（E 组）。和 24 周对照组相比，戒烟组及 24 吸烟周组气管黏膜上皮纤毛倒伏，甚至脱落，杯状细胞增多，小气道壁周围均有不同程度的炎症细胞浸润，以淋巴细胞为主，部分可见淋巴滤泡的形成及少量的巨噬细胞和中性粒细胞，在炎症细胞浸润明显的地方可以看到管壁平滑肌肌束断裂，排列紊乱。（HE×40）图 3 C 图为 12 周吸烟组（C 组）D 图为戒烟组（D 组）E 图为 24 周吸烟组（E 组）。12 周吸烟组、戒烟组、24 周吸烟组气道炎症比较（×40）。C 可见气道旁有炎细胞浸润并聚集成团。D 可见气道周围炎细胞浸润较 C 加重，有淋巴滤泡形成，杯状细胞增多。E 较 C、D 除炎症改变更为严重外，还可见管壁平滑肌肌束断裂，排列紊乱（HE×40）。
【共引文献】
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本文编号：2755773
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