机械通气对大鼠不同组织中CC10蛋白表达的影响

发布时间：2020-08-07 11:28

【摘要】： 第一部分呼吸机相关性肺损伤大鼠动物模型的建立目的建立呼吸机相关性肺损伤(VILI)大鼠动物模型,研究不同潮气量机械通气对肺损伤的影响。方法清洁级Wistar大鼠30只,雄雌不拘,体重200～250g,随机分为三组,n=10,实验前12h禁食,自由饮水。A组对照组,仅作气管切开插管,不行机械通气;余两组气管切开插管后接小动物呼吸机控制呼吸,B组调节潮气量(V_T)7ml/kg,呼吸频率(RR)40次/min,吸呼比1:2,空气吸入,持续通气4h;C组调节V_T40ml/kg,余参数同B组。A组气管插管后即刻,余两组在机械通气4h后,立即剖胸,钳夹左侧主支气管,收集左侧肺组织,称湿重。4%多聚甲醛1ml经气管灌入固定右侧肺组织。右肺HE染色观察肺组织病理学变化;左肺置烤箱80℃干燥至恒重,测定肺湿/干重(W/D)。结果A组肺组织无明显病理学变化,B组大鼠肺组织大体标本表面无出血点,光学显微镜下肺泡壁完整,肺泡腔无出血、充血,无明显炎细胞浸润。C组肺组织表面有明显充血和出血,肺水肿明显,光镜下肺组织失去正常的结构,肺泡过度扩张,肺泡壁断裂,肺泡壁和肺泡腔内大量出血;肺泡腔,血管壁大量炎细胞浸润。与A、B组比较,C组肺组织W/D明显增加,差异有统计学意义((P＜0.05)。结论大潮气量机械通气导致大鼠肺组织严重损伤,通过肺组织病理学变化及肺组织湿/干重表明本实验设定大潮气量(40ml/kg)可建立呼吸机相关肺损伤大鼠动物模型。第二部分机械通气对大鼠不同组织中CC10蛋白表达的影响目的探讨机械通气对大鼠肺组织、支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清中CC10蛋白表达的影响。方法清洁级Wistar大鼠40只,雄雌不拘,体重200～250g,随机分为五组,n=8。实验前12h禁食,自由饮水。Ⅰ组对照组,仅作气管切开插管,不行机械通气;余各组气管切开插管后接小动物呼吸机控制呼吸,调节RR40次/min,吸呼比1:2,空气吸入,Ⅱ组调节潮气量(V_T)7ml/kg,持续通气2 h;Ⅲ组调节V_T7ml/kg,持续通气4 h;Ⅳ组调节V_T40ml/kg,持续通气2 h;Ⅴ组调节V_T40ml/kg,持续通气4 h,建立呼吸机相关肺损伤大鼠动物模型。Ⅰ组在气管插管后即刻,余各组在机械通气结束后相应时点,立即剖胸,取大鼠肺组织,收集BALF和血清。采用western blot法测定各组织中CC10表达、免疫组化计算细支气管Clara细胞比率和HE染色观察肺组织病理学变化。结果(1)与Ⅰ组比较,Ⅳ、Ⅴ组肺组织和BALF中CC10降低(P＜0.05),血清中CC10表达增加(P＜0.05);Ⅳ、Ⅴ组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。(2)血清中CC10与各组肺组织病理评分正相关,(r=0.855,P＜0.01),BALF中CC10与各组肺组织病理评分负相关,(r=-0.477,P＜0.05)。(3)Ⅴ组Clara细胞计数较其它各组降低(P＜0.05)。结论机械通气导致大鼠肺组织上皮通透性增加,致肺组织中CC10蛋白大量漏入血液中,其在血清中浓度与肺组织病理评分正相关,可作为评价VILI的指标。(2)大潮气量,长时间机械通气引起严重肺损伤,肺组织中抗炎因子CC10表达减少,导致炎症反应加重,可能是VILI的发生机制之一。
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R563.8
【图文】：

病理变化,HE染色,肺泡壁,肺泡

HE染色示各组大鼠肺组织病理变化(x4OO)

机械通气对大鼠不同组织中CC10蛋白表达的影响

各组BALF中CC10蛋白的表达

免疫组化染色,肺组织,细支气管,血清

图2各组大鼠肺组织Clara细胞免疫组化染色(又400)I组:个示细支气管上皮Clara细胞V组:t示细支气管腔内脱落的Clara细胞COrr6lationSbotW66nSGrumCC10andALISCO阳8Corr6lationsb6加阳6nBALFCC10andALI污CO阳$2oo姗门“lO。.80。.708OOOODOOU。.印OO0。.幻O护00OOorOOO8OOOOO100oo0.40OO。.30OO0OU0.20O刀2.04乃6刀8001688乃10刀12D0.02刀4刀6刀8.010刀，2.0SC0r.S图3.1血清CC10与肺组织病理评分正相关图3.2BALFCCro与肺组织病理评分负相关

【参考文献】