实验性气道高反应动物模型肺内神经肽及其受体时空分布

发布时间：2020-08-12 19:05

【摘要】： 第一部分气道高反应性动物模型的建立及检测目的：基于气道上皮稳态假说，通过臭氧应激损伤气道上皮细胞，建立新型气道高反应性动物模型。方法：12只新西兰兔随机分为两组，(1)臭氧攻击组：将动物暴露于2.0ppm臭氧中攻击3天，每天1小时。(2)正常对照组。末次攻击后12小时用乙酰甲胆碱雾化吸入激发气道反应，RM-6240C生物信号采集系统实时、动态观测跨肺压和气流量，计算气道阻力，收集肺泡灌洗液进行细胞计数、分类，总蛋白，IL-1含量测定及肺组织病理切片，以证实气道高反应性的存在。结果：①臭氧应激组动物激发后，气道阻力增加，呼气阻力增加程度更明显。②肺泡灌洗液中总蛋白、IL-1含量升高，细胞总数及各细胞分类均高于正常对照组。③肺组织病理切片可见臭氧应激组动物支气管腔狭窄，气道上皮脱落，肺泡、肺间质中大量炎细胞浸润。第二部分降钙素基因相关肽及其受体在气道高反应性形成中的时空分布目的：探讨降钙素基因相关肽在气道高反应性形成中的作用。方法：将25只新西兰兔随机分为五组，分别臭氧攻击0、1、2、4、8天，每天1h，采用放射免疫法检测肺组织匀浆中CGRP含量，RT-PCR测定肺内CGRPRlmRNA表达改变，原位杂交法观察CGRPRl mRNA阳性细胞肺内分布。结果：①放射免疫结果显示，臭氧应激使肺组织匀浆中CGRP浓度24h内迅速升高，并于应激第二天达到峰值，之后缓慢下降，应激第八天降至正常水平；②RT-PCR结果显示，随应激时间的延长，肺内CGRPRl mRNA表达逐渐增强，于应激第4天达到峰值，之后逐渐下降，应激第八天降至正常水平；③原位杂交结果显示，臭氧应激0天组阳性反应细胞主要均匀分布于肺间质、支气管上皮细胞，血管及支气管平滑硕士学位论文摘要肌亦有少量表达。随应激时间的延长，镜下可见阳性反应细胞分布不均，多呈散在的片装或灶状集中于气管、血管周围。臭氧应激第八天，肺组织表达CGRPRI mRNA阳性细胞明显减少。第三部分血管活性肠肚及其受体在气道高反应性形成中的时空分布目的：探讨血管活性肠肽在气道高反应性形成过程中的作用。方法：25只新西兰兔随机分为五组，分别臭氧攻击0、1、2、4、S 天，每天1小时。采用放射免疫法检测肺组织匀浆中VIP含量，RT干CR 测定肺内VIPRlmRNA表达改变，原位杂交法观察VIPRI m删阳性细胞肺内分布。结果：①臭氧应激第一天肺组织匀浆中VIP浓度未见明显改变，随应激时间延长，VIP浓度逐渐增高，于第四天达最高值，四天后开始下降，第八天降至正常水平；②与肺组织匀浆中UP含量变化相似， VIPRI mRNA表达经历了先增加后降低的双向过程，随应激时间的延长，表达逐渐增强，应激2～4天表达达到峰值，之后逐渐下降，应激第八天降至正常水平；③臭氧应激0天组动物肺间质、支气管上皮细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞均有VIPRI mRNA表达，分布均匀。臭氧应激第一天，肺内染色阳性细胞分布未见明显改变，应激2～4 天，阳性细胞分布不均，呈斑片状集中于气管、血管周围，染色强度增加，肺泡腔内亦可见阳性染色细胞，至臭氧应激第八天，阳性染色细胞减少。
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2003
【分类号】：R56

【参考文献】