抗白介素-6受体单克隆抗体对LPS诱导的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡的保护作用

发布时间：2020-08-13 00:22

【摘要】： 目的通过建立LPS诱导体外原代培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡的损伤模型,观察抗IL-6R单克隆抗体对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡的保护作用。 方法分离、纯化、电镜鉴定的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞,培养于24孔培养板中,每孔1×106个细胞,原代培养23h后,按如下方式分5组(每组4个复孔):A组:空白对照组,仅含DMEM培养基;B组:LPS损伤组,DMEM培养基+LPS10μg/ml;C组:DMEM培养基+LPS10μg/ml组+抗IL-6R单克隆抗体5μg/ml;D组:DMEM培养基+LPS10μg/ml组+抗IL-6R单克隆抗体10μg/ml;F组:DMEM培养基+LPS10μg/ml组+抗IL-6R单克隆抗体20μg/ml。培养48小时后,收集细胞行PI单染法流式细胞仪(FCM)凋亡检测,酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养上清液中IL-6、TNF-α的含量,记录结果。 结果流式细胞仪检测显示,与A组相比,B组、C组、D组、E组肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡率显著增加,而C组、D组、E组同B组相比肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡率显著降低,差异均有统计学意义(P0.05),提示抗IL-6R单克隆抗体对肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡具有保护作用。本研究同时分析了肺泡Ⅱ型上皮细胞培养上清液中IL-6和TNF-α浓度,发现与A组相比,B组、C组、D组、E组IL-6和TNF-α浓度显著增加,差异有统计学意义(P0.05);C组、D组、E组IL-6和TNF-α浓度分别与B组比较以及C组、D组、E组三组间IL-6和TNF-α浓度比较均无明显变化,差异无统计学意义(P0.05)。 结论1、LPS可诱导体外培养的肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡,且可以刺激肺泡Ⅱ型上皮细胞增加IL-6、TNF-α分泌;2、抗IL-6R单克隆抗体对LPS所致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡具有保护作用,并呈浓度依赖关系,但其确切机制有待进一步的研究;3、抗IL-6R单克隆抗体对肺泡Ⅱ型上皮细胞分泌IL-6、TNF-α无明显影响。
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R563
【图文】：

图 1 肺泡Ⅱ型上皮细胞碱性磷酸酶染色 图 2 正常肺泡Ⅱ型上皮细胞透射电镜照片（×200） （×20,000）图3 新鲜分离的肺泡Ⅱ型上皮细胞 图4 正常原代培养1天后的肺泡Ⅱ型上皮细胞（×400） （×200）

图 1 肺泡Ⅱ型上皮细胞碱性磷酸酶染色 图 2 正常肺泡Ⅱ型上皮细胞透射电镜照片（×200） （×20,000）图3 新鲜分离的肺泡Ⅱ型上皮细胞 图4 正常原代培养1天后的肺泡Ⅱ型上皮细胞（×400） （×200）

图 1 肺泡Ⅱ型上皮细胞碱性磷酸酶染色 图 2 正常肺泡Ⅱ型上皮细胞透射电镜照片（×200） （×20,000）图3 新鲜分离的肺泡Ⅱ型上皮细胞 图4 正常原代培养1天后的肺泡Ⅱ型上皮细胞（×400） （×200）图 5 正常原代培养 3 天后的肺泡Ⅱ型上皮细胞（×400）

【参考文献】

相关期刊论文 前6条

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本文编号：2791233