慢性阻塞性肺疾病患者稳定期呼吸道合胞病毒感染与气道炎症的关系研究

发布时间：2020-08-22 01:03

【摘要】：背景：慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种以气流受限不完全可逆为特征的疾病。目前COPD发病率和患病率呈上升趋势。到2020年,它将成为全球第三大死因。COPD的本质是慢性气道炎症。众所周知,吸烟和感染在COPD患者持续的气道炎症过程中起重要作用,且可以导致COPD患者肺功能的恶化、加速疾病的进展。长期以来,对呼吸道病毒感染在COPD发病中的作用研究较少,且一直存在争议。 呼吸道病毒感染的发生率很高,有些病毒侵入人体后,可侵犯到重要器官,并且随着急性呼吸道感染的延续,可能发生以下3种情况(1)急性或隐性病毒感染后,病毒潜伏在组织内,形成潜在性感染,无临床症状,在某些条件的刺激下,病毒可再度增生出现急性发作；(2)病毒长期慢性存在组织内,形成慢性感染,不断增生,不断排出病毒,在相当一段时间内可无临床症状；(3)病毒感染后,形成慢发病毒感染,经过很长的潜伏期,以后出现慢性进行性疾病。流行病学研究表明,儿童时期下呼吸道感染可能是引起支气管哮喘及成人后发生COPD的独立危险因素之一,下呼吸道感染的主要病原为病毒,常见的有呼吸道合胞病毒(RSV)和腺病毒(ADV)。 国内外有学者研究证明在腺病毒急性感染期病毒复制停止后,腺病毒EIADNA和蛋白质可持续存在于肺组织中,主要为支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞及黏膜下细胞。且研究显示ADV(双链DNA病毒)在COPD患者的气道炎症、气流阻塞的过程中起一定的作用。而有关RNA病毒特别是呼吸道合胞病毒(RSV)在COPD进展过程中所起的作用国外相关报道也很少,国内尚未有人研究。 目的：本课题拟通过随访测定不同季节80例稳定期COPD患者RSV-RNA感染状况以及患者诱导痰中IL-6、IL-8、MMP-12的浓度变化来探讨RSV感染与COPD患者气道炎症的关系,RSV感染状况与季节的关系,从而帮助我们认识RSV感染在COPD发病中的作用机制,为COPD患者的治疗和预防病情恶化提供理论依据,开辟治疗新思路。 方法：选取我院呼吸科门诊随访的稳定期COPD患者(入选标准符合2007年《慢性阻塞性肺疾病诊治指南(修订版)》的诊断标准)80例并签署知情同意书,并符合下列标准：(1)无支气管哮喘病史,吸入沙丁胺醇200ug后FEV1占预计值%的可逆性10%；(2)无合并严重心、肝、肾等系统疾病；(3)胸片无其他肺部疾病。试验分组如下：正常对照组：无吸烟史的健康对照者20例。均无特殊病史,近2月内无全身感染,经体格检查、胸部X线摄片、肺通气功能测定均未发现异常。 用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定受试者诱导痰RSV-RNA拷贝数和痰液中炎性因子IL-6、IL-8及基质金属蛋白酶-12(MMP-12)的浓度；每个季节进行随访,随访一年,每次随访分别测定上述指标,探讨RSV感染与稳定期COPD患者气道炎症的关系,RSV感染状况与季节的关系。 数据以均数±标准差表示,进行统计学分析。 结果：(1)入选慢性阻塞性肺病病人气流受限客观指标检测结果 入选的慢性阻塞性肺疾病(COPD)病人共80例,其中男47例,女33例,年龄43-72岁,平均(52.33±11.07)岁；病程3-45年,平均(15.63±11.45)年。 各组病人的气流阻塞指标FEV1和FEV1/FVC数值和比较,按常规操作方法检测患者肺活量(VC)、FEV1、FEV1/FVC。VC、FEV1以实测值/预计值的比值表示,FEV1/FVC为实测值,各检测数据以X±S表示。 COPD组病人,FEV1占预计值百分比为(69.59±26.44)%,FEV1%为58.79±19.55,对照组FEV1占预计值百分比为(87.23±29.11)%,FEV1%为74.89±23.86。两组之间的气道阻塞指数差别有统计学意义(P0.05)。 (2)诱导痰RSV Real Time RT-PCR检测方法的建立及检测结果1.COPD组痰标本的收集及处理、痰液细胞分类和计数结果：诱导痰液细胞分类和活力检测合格,细胞总数为(6.74±3.58)X103,上皮细胞20%,细胞存活率40%。同时制备痰细胞学涂片3张,室温下自然风干进行HE染色,光学显微镜下进行细胞计数及分类,分类计数中性粒细胞(55.67±13.71)%、淋巴细胞(11.07±6.70)%、巨噬细胞(13.7±7.45)%及嗜酸性粒细胞(2.2±1.14)%。 2.Real Time荧光定量RT-PCR检测RSV方法的建立 各组病人的呼吸道病毒(RSV)的检出率结果：COPD组病人,RSV阳性检出23例,检出率为28.75%；对照组病人,RSV阳性检出0例；两组RSV感染状况差别具有统计学意义,COPD组RSV明显高于对照组的RSV检出率(P0.05)。 3.诱导痰炎症因子IL-6、IL-8和MMP12等指标的检测结果 各组病人诱导痰中炎症因子IL-6、IL-8和MMP12的检测结果如表8-11,各组检测数据以X±S表示。COPD-RSV阳性组诱导痰炎症因子IL-6、IL-8和MMP12等检测明显高于COPD-RSV阴性组并高于对照组,P0.05。 4.统计学分析显示,入选病人的RSV感染与COPD有较高的相关性以及第二次、第三次和第四次随访结果显示：RSV在COPD稳定期病例组第二次随访的感染率高于对照组,差别有统计学意义,P0.05；RSV感染与COPD病人气道炎症的相关性分析结果显示,RSV感染与诱导痰炎症因子IL-6、IL-8以及MMP12的水平也有一定相关性的关系,其相关性检验结果P0.05,相关性具有统计学意义。 进一步的相关性分析还提示不同季节的RSV感染率有所不同,率的差别具有统计学意义,P0.05,结果显示COPD患者RSV的感染率在冬春季节明显高于夏秋季节。 结论：本研究通过对稳定期COPD患者诱导痰中RSV-RNA、IL-6、IL-8、MMP-12的浓度变化来探讨RSV感染与COPD患者气道炎症的关系,结论为呼吸道合胞病毒感染与稳定期COPD患者气道炎症较强的相关性,COPD稳定期RSV阳性病人痰液中IL-6、IL-8、MMP-12的浓度明显高于对照组,P0.05,而且随着RSV感染率的增高,相关性越强(P0.05)。进一步的分析还提示不同季节的RSV感染率有所不同,冬春季节明显高于夏秋季节。总之,RSV感染与COPD病人的气道炎症有较强的相关性。RSV病毒感染的检测对于了解COPD的病情和指导进一步的治疗具有重要参考价值。
【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R563.9
【图文】：

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【参考文献】

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本文编号：2800068