支气管哮喘气道平滑肌细胞线粒体膜ATP敏感钾通道对PKC信号转导途径及细胞增殖的影响

发布时间：2020-08-23 10:07

【摘要】：目的 探讨线粒体ATP敏感钾通道(mitoKATP)和线粒体膜电位(Δψm)在支气管哮喘气道平滑肌细胞中对PKCα信号转导途径和细胞增殖的影响。 方法 以SD大鼠为实验动物,随机将36只雄性大鼠平均分为正常组和哮喘组,以腹腔注射和雾化吸入卵白蛋白法制备大鼠哮喘模型。取大鼠气道平滑肌细胞,分为六组进行干预:A.正常对照组;B.正常+diazoxide(mitoKATP特异性开放剂)组;C.正常+ 5-HD(mitoKATP特异性阻断剂)组;D.哮喘对照组;E.哮喘+ diazoxide组;F.哮喘+5-HD组。以激光共聚焦显微镜成像法检测线粒体膜电位;western blot法检测细胞PKCα蛋白的表达;realtime PCR法检测细胞PKCαmRNA的表达;MTT法检测细胞的增殖情况,及流式细胞术检测细胞周期。 结果 (1)B组中R-123荧光明显增强,PKCα蛋白表达量增高,PKCαmRNA表达量增高,细胞增殖明显增加,与A组比较,均有p0.05;而C组与正常对照组相比较,上述指标均无明显变化。(2)D组与E组较A组R-123荧光明显增强,PKCα蛋白与PKCαmRNA表达量增高,细胞增殖明显增加(p0.05);其中E组上述指标的增高较D组更显著(p0.05)。而哮喘气道平滑肌细胞以5-HD干预24小时后,与哮喘对照组相比(即F组与D组相比),R-123荧光明显减弱,PKCα蛋白与mRNA表达量降低,细胞增殖明显减少(P0.05)。 结论 在支气管哮喘中,线粒体ATP敏感钾通道开放,线粒体膜电位发生去极化,细胞增殖增加,而这一变化可能是由PKCα信号转导通路介导的。
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R562.25

【参考文献】

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本文编号：2801397