肿瘤坏死因子-α基因多态性与特发性肺纤维化相关性的研究

发布时间：2020-09-17 09:33

　　目的:特发性肺纤维化(Idiopathic pulmonary fibrosis, IPF)是指原因不明并以普通型间质性肺炎(UIP)为特征性病理改变的一种慢性炎症性间质性肺疾病。其确切病因不明,目前认为该病是一种患者在遗传学或其他方面易感并对某种特殊侵害发生反应的疾病。TNF-α是由活化的单核-巨噬细胞产生的一种活性多肽,认为其在肺纤维化的发病过程中起着重要作用。近年来研究显示TNF-α具有多态性,并且TNF基因多态性与肺炎、慢性阻塞性肺疾病、哮喘、肺癌等呼吸系统疾病遗传易感性之间关系的文献已有大量报道。但TNF-α基因多态性与特发性肺纤维化相关性的研究,国内外报道结果不完全一致。本试验旨在通过研究特发性肺纤维化患者TNF-α基因启动子区域内308位点G/A多态性与中国河北地区汉族特发性肺纤维化的相关性,探讨中国河北地区汉族特发性肺纤维化患者的遗传易感因素、发病机制,并观察特发性肺纤维化患者血清TNF-α浓度变化,探讨其在IPF发病中的作用及可能机制。方法:采用基于人群的病例-对照研究方法,参照2002年中华医学会呼吸分会颁布的《特发性肺(间质)纤维化诊断和治疗指南(草案)》中的诊断标准,选取临床上确诊的特发性肺纤维化(IPF)的河北地区汉族患者,共计84例,其中男性51例,女性33例,年龄43岁～88岁,平均年龄(66.7±9.5)岁,且除外继发性肺纤维化、急性感染、肿瘤、栓塞、心衰、控制不良的糖尿病、消化性溃疡、严重骨质疏松、结核病及虽然诊断为IPF,但已经接受激素或免疫抑制剂治疗的患者。对照组:选择汉族健康体检者,共计80例,其中男性42例,女性38例,年龄40岁～73岁,平均年龄(50.3±7.8)岁。且既往无变态反应性疾病病史,近期无感染,无免疫抑制剂应用史。采集IPF患者及健康对照者外周静脉5ml,以蛋白酶K消化-苯酚-氯仿有机溶剂法和树脂型TM基因组DNA提纯试剂盒提取外周血白细胞DNA,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法分析检测IPF患者及健康对照者TNF-α基因启动子区域内308位点基因组多态性;采用酶联免疫吸附试验检测IPF患者及健康对照组血清中TNF-α的表达水平。结果: 1 TNF-α-308位点基因多态性分析 1.1 TNF-α-308的基因型本实验检测得到三种基因型:G/G型、G/A型及A/A型;其中G/G型为野生型,G/A型及A/A型为突变型。健康对照组与IPF组均符合Hardy-Weinberg遗传平衡性检验(P0.05),具有良好的可比性。 1.2 TNF-α-308 G/A多态性在两组间的分布情况健康对照组80例中检测出G/G基因型67例,占83.8%,G/A基因型12例,占15.0%,A/A基因型1例,占1.2%。IPF组84例中检测出G/G基因型57例,占67.9%,G/A基因型22例,占26.2%,A/A基因型5例,占5.9%。TNF-α-308的基因多态性在两组间的分布频率比较有统计学差异(χ2=6.32, P0.05),且G/A及A/A基因型携带者相对于G/G基因型携带者患IPF的比值比(OR值)为2.441(95% CI 1.153~5.168)。 1.3 TNF-α-308的各等位基因频率在两组间的分布情况健康对照组80例中G等位基因频率为91.3%,A等位基因频率为8.7%,IPF组84例中G等位基因频率为81.0%,A等位基因频率为19.0%。TNF-α-308的各等位基因频率在两组间的分布频率比较有统计学差异(χ2=7.207, P0.05),且A等位基因携带者相对于G等位基因携带者患IPF的比值比(OR值)为2.454(95% CI 1.256~4.796)。 2血清TNF-α蛋白浓度分析 IPF组与健康对照组血清TNF-α蛋白浓度分别为10.92±2.80 ng/L、4.95±2.11 ng/L,IPF组血清TNF-α蛋白浓度高于健康对照组,两组比较具有统计学意义(P0.05)。结论: 1结合本研究推测TNF-α-308位点的G/A基因多态性与中国河北地区汉族人群特发性肺间质纤维化的易感性相关,IPF患者具有更高的A等位基因频率,G/A及A/A基因型的携带者发生IPF的风险较G/G基因型携带者高。结合对其他地区、种族人群的研究,说明该基因位点多态性与IPF的易感性存在种族、地区的差异。 2 IPF组患者血清TNF-α浓度高于健康对照组,提示TNF-α参与了肺纤维化的发生、发展过程。
【学位单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2011
【中图分类】：R563.9

【参考文献】