急性肺血栓栓塞症时粘附分子的作用及中药红花注射液治疗的影响

发布时间：2020-10-14 08:40

　　 第一部分 大鼠肺血栓栓塞症时及尿激酶治疗后血管内皮细胞上细胞间粘附分子-1,P-选择素的变化 目的观察大鼠肺血栓栓塞症(pulmonary thromboembolism,PTE)时,肺血管内皮细胞上细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion-1,ICAM-1),P-选择素-(P selectin,Ps)的水平和溶栓治疗的影响。 方法采用自体血栓回输法建立PTE模型,随机分为对照组、模型组、溶栓组。各组动物在栓塞后1小时,3小时,24小时,72小时,120小时五个时间段分别处死,取动脉血做血气分析,行病理分析,免疫组化和原位杂交的方法检测肺血管内皮细胞上ICAM-1和Ps的蛋白及mRNA的水平。 结果肺栓塞后病理可见肺动脉血栓形成,炎性反应明显。肺血管内皮上ICAM-1蛋白及mRNA表达在栓塞后3小时开始增高(P0.01),而Ps蛋白及mRNA表达在栓塞后1小时开始增高(P0.01)。溶栓治疗后,栓塞、出血、萎缩减轻,但炎性反应有所加重,肺血管内皮上ICAM-1和Ps的水平再次升高(P0.01)。 结论:PTE后细胞粘附分子在引起急性肺损伤中起了重要作用,溶栓治疗可以改善PTE的血气,但对肺组织的炎性损伤没有帮助,可能与缺血再灌注损伤有关,因此,在PTE溶栓治疗的同时抗炎治疗也是非常重要的。 第二部分 大鼠肺血栓栓塞症NO的变化及红花注射液的影响 目的观察大鼠肺血栓栓塞症NO水平的变化,探讨红花注射液或溶栓治疗对大鼠肺血栓栓塞症的影响及其作用机制。 方法150只大鼠随机分为对照组、PTE模型组、UK治疗组、红花组(SA组)和UK+SA治疗组。采用自体血栓回输法建立动物模型。取动脉血测血气,常规病理学检测,用硝酸还原酶法检测血清中NO的水平,免疫组化及原位杂交法检测肺血管内皮细胞上ICAM-1、P选择素的表达水平,利用RT-PCR法检测肺组织中蛋白激酶CmRNA的表达。 结果1:病理及血气:PTE组、UK组和SA组肺组织病理损伤明显,UK+SA组病理改变明显减轻。UK组和UK+SA组血气有明显改善。2:免疫组化及原位杂交显示:SA组,UK+SA组肺血管内皮细胞上P-选择素蛋白及mRNA的表达较模型组、溶栓组明显降低(P0.01)。SA组,UK+SA组肺血管内皮细胞上ICAM-1蛋白及mRNA的表达除了1小时外,其它各时间段较模型组、溶栓组明显降低(P0.05);3:NO的水平:模型组NO的水平随时间推移而减低,而UK组,SA组和UK+SA组NO水平均有所增高,其中UK+SA组上升幅度最大,与模型组、UK组比较,下降极为显著(P0.05)。4:蛋白激酶C表达:模型组PKC水平是随时间推移而逐渐增加的,UK组PKC水平较模型组有所增加,而SA组,UK+SA组PKC的水平比模型组的水平下降,UK+SA组下降更为明显(P0.05)。 结论PTE后溶栓结合红花注射液治疗可通过抑制蛋白激酶C,促进NO的生成,下调肺血管内皮细胞上ICAM-1及P选择素的表达,减轻PTE时肺的炎性损伤。 第三部分 红花含药血清在缺氧复氧条件下对大鼠肺动脉内皮细胞 P-选择素及细胞间粘附因子-1基因表达的影响 目的:观察红花含药血清在缺氧复氧条件下对大鼠肺动脉内皮细胞P-选择素及细胞间粘附因子-1基因表达的影响,进一步探讨NF-KB途径对P-选择素及细胞间粘附因子-1基因的调控,由此分析肺栓塞溶栓后缺血再灌注损伤的部分机制。 方法:分别在常氧、缺氧、复氧及红花含药血清干预条件下观察原代分离培养的大鼠肺动脉血管内皮细胞P-选择素及细胞间粘附因子-1基因的表达,采用细胞培养、RT-PCR、Western blot、中药血清药理学方法、免疫细胞化学染色法等技术,观察不同条件下大鼠肺动脉内皮细胞P-选择素及细胞间粘附因子-1基因的表达变化;复氧后给予红花含药血清干预观察NF-kB与P-选择素及细胞间粘附因子-1基因表达的变化。 结果:显示常氧组细胞1h、6h、12h、24h各个时间点其P-选择素及ICAM-1 mRNA水平没有明显差异(P0.05),而缺氧组的各个时间点P-选择素及ICAM-1mRNA水平有所上调,但较同时间点常氧组表达无显著性差异。缺氧12h后再给氧1 h、6h、12hP-选择素及ICAM-1mRNA及蛋白的表达均明显上调,缺氧后再给氧6 h上调最显著;NF-kB蛋白表达亦明显上调。缺氧12h后再给氧同时给予红花含药血清干预组各个时间点P-选择素及ICAM-1mRNA上调水平明显下降,NF-kB蛋白表达亦明显下调,同单纯缺氧再给氧组相比,差异有显著性(P均≤0.01)。 结论:单纯缺氧状态下大鼠肺动脉血管内皮细胞P-选择素及ICAM-1表达无明显变化,缺氧复氧条件下P-选择素及ICAM-1过度表达,可能参与了肺栓塞溶栓后缺血再灌注损伤的发病机制,红花注射液可通过抑制NF-KB对于这种应激损伤有明显的保护作用。
【学位单位】：华中科技大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2005
【中图分类】：R563.5;R285
【部分图文】：

对照组肺组织

溶栓组肺组织

正常对照组(HEx100)
【参考文献】

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本文编号：2840434