Atrogin-1在慢性阻塞性肺疾病骨骼肌萎缩中的作用及其与IGF-1的关系

发布时间：2017-04-03 12:15

  本文关键词：Atrogin-1在慢性阻塞性肺疾病骨骼肌萎缩中的作用及其与IGF-1的关系，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的探讨Atrogin-1蛋白在慢性阻塞性肺疾病中对骨骼肌的作用及与IGF-1的关系. 方法70只Wistar大鼠随机分为COPD模型组和对照组,各35只。采用熏烟加气管内滴注猪胰弹性蛋白酶法建立COPD动物模型,对照组不熏烟,用生理盐水代替猪胰弹性蛋白酶进行手术。两组大鼠分别进行一般情况的观察,104天后检测大鼠的肺功能,取肺组织、趾长伸肌、膈肌,进行固定、病理切片和蛋白质提取。肺组织和趾长伸肌组织行HE染色光镜观察病理改变结果,趾长伸肌组织和膈肌再行免疫组化法和western bolt法检测Atrogin-1蛋白和工GF-1蛋白的表达与定量及相关性的研究。所有结果应用SPSS17.0软件进行统计分析。 结果(1)肺功能检查发现COPD模型组大鼠的FEV0.3/FVC(%)和FEV0.3明显低于对照组,R工高于对照组,其差别有显著性(均P0.05)。对照组大鼠肺功能未见明显异常。 (2)大鼠的肺和支气管组织HE染色病理观察示：COPD模型组大鼠的肺组织破坏和炎症程度明显大于对照组,形成了肺大疱和慢性炎症；对照组肺泡结构正常,未见炎症细胞浸润。 (3) COPD组的大鼠趾长伸肌的肌纤维面积和单位面积的细胞核数量较对照组减少。 (4)免疫组化和western bolt法均测得COPD模型组趾长伸肌和膈肌组织中Atrogin-1蛋白含量表达明显高于对照组,IGF-1蛋白量低于对照组。 (5) COPD大鼠骨骼肌中IGF-1蛋白表达量与Atrogin-1的量呈负相关。 结论(1)COPD模型组大鼠的骨骼肌细胞出现萎缩,对照组大鼠骨骼肌细胞萎缩不明显。 (2)骨骼肌Atrogin-1蛋白表达增加和IGF-1蛋白表达减少可能是COPD大鼠骨骼肌萎缩的机制之一。 (3)在COPD中,骨骼肌中IGF-1蛋白含量与Atrogin-1蛋白含量呈负相关。
【关键词】：慢性阻塞性肺疾病 骨骼肌 Atrogin-1 IGF-1
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R563.9
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 目录9-10
• 前言10-13
• 流程图12-13
• 第一章 材料与方法13-26
• 1.1 材料13-20
• 1.1.1 实验动物13
• 1.1.2 主要试剂13-14
• 1.1.3 主要仪器14-16
• 1.1.4 试剂配制16-20
• 1.2 方法20-26
• 1.2.1 动物分组及处理20-22
• 1.2.2 处死动物的时间、方式、肺功能的测定及标本的处理22-24
• 1.2.3 指标检测24-25
• 1.2.4 统计学处理25-26
• 第二章 结果26-38
• 2.1 大鼠的一般情况26
• 2.2 两组大鼠肺功能的检测26-27
• 2.3 组织的病理学检查27-30
• 2.3.1 光镜下大鼠肺和支气管组织的病理学观察27-28
• 2.3.2 各组大鼠肌肉组织的病理变化28-30
• 2.4 大鼠肌肉组织石蜡切片免疫组化法检测30-31
• 2.4.1 Atrogin-1在趾长伸肌的免疫组化表达30
• 2.4.2 IGF-1在趾长伸肌的免疫组化表达30-31
• 2.4.3 Atrogin-1在膈肌的免疫组化表达31
• 2.4.4 IGF-1在膈肌的免疫组化表达31
• 2.5 Western blot法检测大鼠Atrogin-1和IGF-1的蛋白质含量31-32
• 2.6 相关性的比较32-33
• 附图33-38
• 第三章 讨论38-46
• 3.1 模型的评价38-40
• 3.2 COPD骨骼肌萎缩40-41
• 3.3 Atrogin-1的表达与COPD骨骼肌萎缩的关系41-43
• 3.4 IGF-1的蛋白表达与COPD骨骼肌萎缩的关系43-44
• 3.5 骨骼肌Atrogin-1蛋白含量与IGF-1蛋白含量的相关性44-46
• 第四章 结论46-47
• 参考文献47-50
• 综述50-56
• 参考文献53-56
• 致谢56-57
• 硕士期间发表的文章57

【参考文献】

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本文编号：284317