肺气肿大鼠全病程中膈肌功能的研究

发布时间：2020-11-20 19:22

　　 目的 本研究应用被动吸烟复制大鼠肺气肿模型,采用酶组织化学、免疫印记技术等不同的检测方法,检测肺气肿大鼠全病程中的膈肌纤维类型和mTor蛋白的变化,探讨肺气肿全病程中膈肌功能异常的分子生物学机制。 实验材料及方法 一、实验动物和分组 选取7周龄健康雄性Wistar大鼠120只,体重250—280g,由中国医科大学实验动物中心提供,清洁度Ⅰ级,常规饲料自由饮水,温度22±1℃,湿度50%左右,明／暗周期为12h。随机被分为3组,分别为对照组(C)、肺气肿吸烟组(E)、肺气肿戒烟组(N),分别在肺气肿形成0天、3月、6月、12月取材,每组10只。 二、被动吸烟复制大鼠肺气肿模型 将肺气肿大鼠每天放入自制的烟熏舱(体积为0.25 m3),暴露于10支黄果树牌香烟,每次被动吸烟1小时5天／周,持续75天。 三、主要实验方法 (一)肺组织病理：HE染色 (二)膈肌纤维检测：采用琥珀酸脱氢酶方法,将肌纤维分为氧化型和酵解型,其中染色深的是氧化型纤维,染色浅的酵解型纤维。 (三)mTOR蛋白测定：Western Blotting 四、统计学分析 所有数据用均数±标准差(x±s)表示,采用完全随机设计资料单因素方差分析进行显著性检验,若P0.05,再进行q检验,比较任意两组间的差异有无统计学意义。采用单因素直线回归分析,比较干预因素与测量因素有无相关性。所有分析用SPSS13.0软件进行。 结果 1、在肺气肿形成0天和3个月时,E组、N组的氧化型纤维比例高于对照组(P0.05)。在肺气肿形成6个月时,N组的氧化型纤维比例高于对照组(P0.05),E组的氧化型纤维比例与对照组比较无显著差异(P0.05)。在肺气肿形成12个月时,E组、N组的氧化型纤维比例低于对照组(P0.05)。 2、年龄与氧化型纤维比例的相关分析结果显示正相关(P0.05)。 3、在肺气肿形成0天和3个月时,E组、N组的mTOR蛋白高于对照组(P0.05)。在肺气肿形成6个月时,N组的mTOR蛋白高于对照组(P0.05),E组的mTOR蛋白与对照组比较无显著差异(P0.05)。在肺气肿形成12个月时,E组、N组的mTOR低于对照组(P0.05)。 结论 1、肺气肿大鼠膈肌氧化型纤维比例随疾病进展先增加后下降,说明膈肌出现代偿和失代偿过程。 2、随着年龄的增加,膈肌氧化型纤维比例逐渐升高。 3、肺气肿早期调节骨骼肌增生的信号蛋白mTOR蛋白表达高于对照组,肺气肿晚期mTOR蛋白表达低于对照组。
【学位单位】：中国医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2010
【中图分类】：R563.3
【部分图文】：

光镜下观察，可见支气管壁淋巴细胞、浆细胞浸润，支气管粘膜上皮纤毛倒伏、粘连或脱落，杯状细胞明显增多，胞体增大。肺泡扩大融合，弹力纤维呈破坏性改变，肺泡数量减少，见图2。肺气肿(100x)对照组(100x)图2，实验组和对照组肺脏HE染色二、各组大鼠体重变化肺气肿形成O天，3月实验组和对照组体重无差异(P>0.05)，6月和12月实验组和对照组比较有差异(P<0.05)，见表2。表2，各组大鼠体重(g)，以x士s表示O天3月6月肺气肿吸烟组(E)肺气肿戒烟组伽)对照组(C)361.9士22.57395.3士38.10 403.1士23.29*368.2士24.93 412.1士25.18462.6士54.85*369.0士 12.29418.5士28.97507.5士20.9512月500.1士60.88*566.0士25.32*609.5土37.25注:*表示与对照组大鼠的体重比较，P<0.05。三、隔肌纤维类型表达(一)月两肌纤维类型分布氧化型纤维 (1a+llb)呈深染

(一)月两肌纤维类型分布氧化型纤维 (1a+llb)呈深染，酶颗粒多，酵解型纤维 (IIa)呈淡染色，酶颗粒少(见图3)。在肺气肿形成0天和3个月时，E组、N组的氧化型纤维比例高于对照组(P<0.05)。在肺气肿形成6个月时，N组的氧化型纤维比例高于

E组的氧化型纤维比例与对照组比较无显著差异在肺气肿形成12个月时，E组、N组的氧化型纤维比例低于对照组分别见表3，图4。 (P>0.05)。 (P<0.05)，对照组(400x)肺气肿吸烟组(400x)肺气肿戒烟组(400x)图3，SDH染色表3，月两肌纤维类型分布(%)，以x士S表示O天3月6月月市气肿吸烟组(E)肺气肿戒烟组(N)对照组(C)55.55士9.38*67.46士 6.58*61.25士 10.6655.77士5.88*62.79士12.49*73.94士12.32*47一37士 6.5453.76士10.6264.91士8.9012月59.57士7.70* 63.37士 10.07* 73.19士9.03*注:*与对照组比较，P<0.05。
【参考文献】

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1 李红梅,崔德健,佟欣,庞宝森,高亚兵,王德文;熏香烟加气管注内毒素和单纯熏香烟法建立大鼠COPD模型[J];中国病理生理杂志;2002年07期

本文编号：2891877