支气管哮喘外周血淋巴细胞DNA损伤与氧化应激的相关性研究

发布时间：2020-12-16 22:09

　　目的：检测支气管哮喘患者外周血淋巴细胞DNA损伤和血浆MPO、MDA含量,探讨DNA损伤与氧化应激的相关性,从而为哮喘的防治提供新的思路。方法：1.以支气管哮喘患者为研究对象,20例重症哮喘患者作为重度组,9例轻度哮喘患者作为轻度组、9例健康体检者作为正常组。肘静脉采血检测淋巴细胞DNA损伤及血浆MPO、MDA含量。2.彗星实验检测淋巴细胞DNA损伤：枸橼酸化的静脉血2ml与HanK’s液2ml混匀,小心加于2ml淋巴细胞分离液的表面上,1500转/分离心15分钟,收集分界处淋巴细胞,再次1500转/分离心10分钟,收集新鲜的淋巴细胞沉淀20μl与0.7%低熔点凝胶75μl混匀后,铺于预先铺有加热的1%正常熔点凝胶的载玻片上,加盖玻片,40℃冷藏放置10分钟使胶牢固。移去盖玻片,将载玻片放入预冷的细胞裂解混悬液中,40℃下裂解至少1小时。取出载玻片用生理盐水漂洗两次,置入碱性电泳缓冲液中,’室温放置20分钟使DNA碱解旋,然后电泳（25 V/300 mA,20 min）。电泳后取出载玻片,生理盐水漂洗两次。溴化乙锭避光染色（70μl/玻片）10分钟。应用荧光显微镜（激发光波长515-5... 

【文章来源】：西南医科大学四川省

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

各组淋巴细胞ONA的损伤

表1彗星实验各组尾长变化(x士s)Table1TheehangeoftailIengthineaehgrouPintheCometassay组别正常组轻度组重度组F值例数(n)992O尾长印x)0.59士0.31*2.7升0.49*‘35.93士0.76▲14133.26注:▲与正常组比较，P<0.05;*与重度组比较，P<0.05

图3彗星实验各组尾距比较Figure3ComParisonoftailmomentineachgrouPintheCometassay2.各组病人血浆MPO含量变化(见表3)哮喘急性发作期重度组、轻度组血浆MPO含量明显高于正常组，显著性差异(p<0.05);随哮喘发作程度加重，MPO含量增加，重度组轻度组比较，重度组明显高于轻度组，经统计学处理有明显差异(P<0.05


本文编号：2920863