SARS患者临床标本中脊髓灰质炎病毒及呼肠病毒的研究
发布时间：2021-01-23 17:41
严重急性呼吸综合征（SARS）作为一种新发传染病,2003年4月WHO已正式宣布SARS-冠状病毒（SARS-CoV,SARS Coronavirus）是导致SARS的病原体。然而2003年军事医学科学院微生物流行病研究所却从北京第一例确诊SARS患者及其母亲的咽拭子标本中分离到了呼肠病毒,在我们进一步研究呼肠病毒的基因序列时,却意外的在标本中检测到了脊髓灰质炎病毒。为了进一步研究SARS的病原学,我们采用细胞培养法、RT-PCR、中和试验、血清学检测等方法对SARS患者发病时及痊愈2年后的临床标本进行呼肠病毒和脊髓灰质炎病毒的分离鉴定。 在SARS发病时,我们利用HEp-2细胞对4份确诊SARS患者的咽拭子标本进行病毒分离,接种后细胞均在培养第3d开始出现细胞病变效应。采用随机引物RT-PCR对细胞培养上清液进行了病毒核酸扩增,结果在4份标本中扩增出了脊髓灰质炎病毒,3份标本中扩增到了呼肠病毒,4份咽拭子标本接种HEp-2细胞后,细胞病变均不能被呼肠病毒1、2、3型抗血清中和,但却可以被含有1型脊髓灰质炎病毒的混合标准抗血清中和,中和试验结果显示这4份咽拭子标本中均含有Ⅰ型脊髓灰质炎...
【文章来源】：中国人民解放军医学院北京市
【文章页数】：108 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
脊髓灰质炎病毒PcR产物克隆至-Taeys载体后Eocul酶切产物的电泳图谱
了逆转录PcR扩增病毒核酸，扩增产物经克隆至Taeys载:在4份标本中均扩增出了脊髓灰质炎病毒基因片段，在3D、YU)中扩增出了呼肠病毒基因片段。髓灰质炎病毒PcR产物克隆至-Taeys载体后Eocul酶切产物的电
图5.脊髓灰质炎病毒突变位点的测序结果及图谱(2)新分离呼肠病毒52、S3、54、L3片段的序列测定及分析:随机引物锚定PCR法扩增新分离呼肠病毒基因组并克隆至-Taesy载体后测序，结果显示:所扩增的部分呼肠病毒核普酸序列与GneeBakn中己知的呼肠病毒1、2、3型的核昔酸序列具有高度同源性，新分离呼肠病毒52、S3、54、L3片段的全基因组核普酸序列，与GneeBakn中呼肠病毒1、2、3型核普酸序列的同源性分别为83%一92%、74%一79%和85%一9k20r;根据其核普酸序列推定的相应氨基酸序列与呼肠病毒1、2、3型的同源性分别为95%一99%、85%一96%和95%一99%，详细结果见表6。表7.52、53、54、L3序列与呼肠病毒l、2、3型同源性比较核营酸同源性(%)氨基酸同源性(%)R3一98959599R2一9585%90只︸︸、︸︸、︶，ng9Q声Q了R3一858785R292一79777674﹃气了j︸I口，‘O八O八O八QRx一5352L3S4
【参考文献】：
期刊论文
[1]新分离呼肠病毒的致病性及其与SARS相关性的实验动物研究[J]. 朱虹,何君,何诚,甘永华,黄如统,端青. 军事医学科学院院刊. 2004(03)
[2]中国急性弛缓性麻痹（AFP）病例中脊髓灰质炎病毒疫苗株VP1区基因变异的研究[J]. 张勇,祝双利,赵蓉,李杰,陈立,侯晓辉,王东艳,张礼璧,许文波. 病毒学报. 2004(01)
[3]SARS患者双份血清中抗呼肠病毒和冠状病毒中和抗体的测定[J]. 朱虹,貌盼勇,何君,马静,胡燕,朱雷,黄如统,端青. 军事医学科学院院刊. 2004(01)
[4]新分离呼肠病毒BYD1株实验感染食蟹猴动物模型的初步建立[J]. 朱虹,左庭婷,何君,甘永华,檀华,张浩杰,宋立华,黄如统,周育森,端青. 军事医学科学院院刊. 2003(05)
[5]再次从SARS患者肺组织中分离与检出呼肠病毒[J]. 杨怡,李卫华,端青,朱虹,郎振为,孟忻,张德添,何昆,周涛,张飒,陈德蕙. 军事医学科学院院刊. 2003(04)
[6]从SARS患者标本中分离的呼肠病毒的分纯及鉴定[J]. 左庭婷,檀华,何君,朱虹,张浩杰,宋立华,黄如统,端青. 军事医学科学院院刊. 2003(04)
[7]呼肠病毒,在SARS患者中分离与初步鉴定[J]. 端青,朱虹,杨怡,李卫华,周育森,何君,何昆,张浩杰,周涛,宋立华,甘永华,檀华,靳宝锋,李慧艳,左庭婷,陈德蕙,张学敏. 科学通报. 2003(13)
[8]初步实行计划免疫地区健康人群脊髓灰质炎病毒携带状况研究[J]. 方正杰,邱炳光,程贤,陈鸿就,吴志雄,王彬. 广东卫生防疫. 1998(02)
[9]河北省健康人群脊髓灰质炎中和抗体水平和肠道病毒携带状况监测[J]. 张振国,宋慧军,陈玫,刘兰芬,郭彧. 疾病监测. 1995(05)
本文编号：2995633
【文章来源】：中国人民解放军医学院北京市
【文章页数】：108 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
脊髓灰质炎病毒PcR产物克隆至-Taeys载体后Eocul酶切产物的电泳图谱
了逆转录PcR扩增病毒核酸，扩增产物经克隆至Taeys载:在4份标本中均扩增出了脊髓灰质炎病毒基因片段，在3D、YU)中扩增出了呼肠病毒基因片段。髓灰质炎病毒PcR产物克隆至-Taeys载体后Eocul酶切产物的电
图5.脊髓灰质炎病毒突变位点的测序结果及图谱(2)新分离呼肠病毒52、S3、54、L3片段的序列测定及分析:随机引物锚定PCR法扩增新分离呼肠病毒基因组并克隆至-Taesy载体后测序，结果显示:所扩增的部分呼肠病毒核普酸序列与GneeBakn中己知的呼肠病毒1、2、3型的核昔酸序列具有高度同源性，新分离呼肠病毒52、S3、54、L3片段的全基因组核普酸序列，与GneeBakn中呼肠病毒1、2、3型核普酸序列的同源性分别为83%一92%、74%一79%和85%一9k20r;根据其核普酸序列推定的相应氨基酸序列与呼肠病毒1、2、3型的同源性分别为95%一99%、85%一96%和95%一99%，详细结果见表6。表7.52、53、54、L3序列与呼肠病毒l、2、3型同源性比较核营酸同源性(%)氨基酸同源性(%)R3一98959599R2一9585%90只︸︸、︸︸、︶，ng9Q声Q了R3一858785R292一79777674﹃气了j︸I口，‘O八O八O八QRx一5352L3S4
【参考文献】：
期刊论文
[1]新分离呼肠病毒的致病性及其与SARS相关性的实验动物研究[J]. 朱虹,何君,何诚,甘永华,黄如统,端青. 军事医学科学院院刊. 2004(03)
[2]中国急性弛缓性麻痹（AFP）病例中脊髓灰质炎病毒疫苗株VP1区基因变异的研究[J]. 张勇,祝双利,赵蓉,李杰,陈立,侯晓辉,王东艳,张礼璧,许文波. 病毒学报. 2004(01)
[3]SARS患者双份血清中抗呼肠病毒和冠状病毒中和抗体的测定[J]. 朱虹,貌盼勇,何君,马静,胡燕,朱雷,黄如统,端青. 军事医学科学院院刊. 2004(01)
[4]新分离呼肠病毒BYD1株实验感染食蟹猴动物模型的初步建立[J]. 朱虹,左庭婷,何君,甘永华,檀华,张浩杰,宋立华,黄如统,周育森,端青. 军事医学科学院院刊. 2003(05)
[5]再次从SARS患者肺组织中分离与检出呼肠病毒[J]. 杨怡,李卫华,端青,朱虹,郎振为,孟忻,张德添,何昆,周涛,张飒,陈德蕙. 军事医学科学院院刊. 2003(04)
[6]从SARS患者标本中分离的呼肠病毒的分纯及鉴定[J]. 左庭婷,檀华,何君,朱虹,张浩杰,宋立华,黄如统,端青. 军事医学科学院院刊. 2003(04)
[7]呼肠病毒,在SARS患者中分离与初步鉴定[J]. 端青,朱虹,杨怡,李卫华,周育森,何君,何昆,张浩杰,周涛,宋立华,甘永华,檀华,靳宝锋,李慧艳,左庭婷,陈德蕙,张学敏. 科学通报. 2003(13)
[8]初步实行计划免疫地区健康人群脊髓灰质炎病毒携带状况研究[J]. 方正杰,邱炳光,程贤,陈鸿就,吴志雄,王彬. 广东卫生防疫. 1998(02)
[9]河北省健康人群脊髓灰质炎中和抗体水平和肠道病毒携带状况监测[J]. 张振国,宋慧军,陈玫,刘兰芬,郭彧. 疾病监测. 1995(05)
本文编号：2995633
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/huxijib/2995633.html
最近更新
教材专著
