Smad7条件敲除小鼠肺组织病理性衰老的研究

发布时间：2021-01-25 05:38

　　随着人口老龄化的速度越来越快,我国已经正式步入老龄社会初期。在过去的几年中,人口老龄化已经成为慢性非传染性疾病最大的风险因素,并且直接导致了衰老相关疾病的发病率和死亡率的不断上升。肺属于衰老较早的组织器官之一,一些呼吸系统疾病如慢性阻塞性肺病（COPD）、肺癌、哮喘和特发性肺纤维化（IPF）的发病都可能与肺组织的衰老密切相关。在本研究中,我们以肺组织条件敲除Smad7小鼠为模型,分析了在肺组织中特异敲除Smad7对肺衰老及肺组织中具有成体干细胞特征的肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）衰老的影响。我们发现条件敲除Smad7小鼠肺组织中与衰老有关的标志物β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）阳性染色的细胞数显著增加,肺组织细胞周期抑制蛋白p21、p16显著升高,纤维化标志物α-SMA（α-smooth muscle actin）以及1型胶原也显著升高。进一步分析表明条件敲除Smad7小鼠肺组织中AECⅡ细胞被p21、p16以及与衰老有关的异染色质灶（SAHF）的标志物HP1γ标记的阳性细胞数显著增加。这些结果提示条件敲除Smad7小鼠的肺组织以及肺泡Ⅱ型上皮细胞发生显著衰老。另外我们还发现条件敲除S... 

【文章来源】：杭州师范大学浙江省

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图3.1条件敲除Smad7引起肺组织衰老以及形态的改变A：Smad7+/+与SPA-Cre;Smad7flox/flox小鼠肺组织冰冻切片SA-β-gal染色，蓝色的细胞为SA-β-gal阳性

图 3.2 条件敲除 Smad7 引起肺组织中衰老相关标志物的表达显著增加A：实时荧光定量 PCR 检测 Smad7+/+与 SPA-Cre;Smad7flox/flox小鼠肺组织中细胞周期抑制蛋白 p21、p16 的 mRNA 表达量。B：免疫蛋白印迹检测 Smad7+/+与SPA-Cre;Smad7flox/flox小鼠肺组织中细胞周期抑制蛋白 p21、p16 的蛋白表达量。

图 3.3 条件敲除 Smad7 引起肺组织中肺泡 II 型上皮细胞衰老显著增加A：Smad7+/+与 SPA-Cre;Smad7flox/flox小鼠肺组织冰冻切片 SPC 分别与 p21、p16、HP1γ免疫荧光双标染色的 40 倍视野代表性图片。B：Smad7+/+与 SPA-Cre;Smad7flox/flox小鼠肺组织冰冻切片 SPC 与 p21 免疫荧光双标染色的 20 倍视野代表性图片以及定量统计分析结果。C：Smad7+/+与 SPA-Cre;Smad7flox/flox小鼠肺组织冰冻切片 SPC 与 p16 免疫荧光双标染色的20 倍视野代表性图片以及定量统计分析结果。D：Smad7+/+与 SPA-Cre;Smad7flox/flox小鼠肺组织冰冻切片 SPC 与 HP1γ免疫荧光双标染色的 20 倍视野代表性图片以及定量统计分析结果。E：实时荧光定量 PCR 检测 Smad7+/+与 SPA-Cre;Smad7flox/flox小鼠肺组织中 T1α、Ki67的 mRNA 表达量。


本文编号：2998678