雾化吸入灭活草分枝杆菌对哮喘小鼠模型白细胞介素-17F表达的影响

发布时间：2017-04-16 03:23

  本文关键词：雾化吸入灭活草分枝杆菌对哮喘小鼠模型白细胞介素-17F表达的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的探讨雾化吸入灭活草分枝杆菌治疗哮喘小鼠模型中白细胞介素-17F（IL-17F）表达对气道炎症和气道高反应性（AHR）的影响。 方法将24只雄性BALB/c小鼠，采用数字随机表法分为3组，每组8只：分别为对照组、模型组、治疗组。建立鸡卵清蛋白（OVA）致敏的哮喘小鼠模型。在实验的第1、8、15天，予模型组和治疗组每只小鼠腹腔注射混合25μg OVA和1mg氢氧化铝粉的PBS悬浊液0.2ml致敏；第22至28天，将OVA致敏的小鼠至于密闭雾化箱内，予2%的OVAPBS悬浊液经雾化器雾化吸入激发30min，每天1次。第29-33天，治疗组继续予灭活草分枝杆菌溶液雾化吸入干预30min。对照组则予PBS替代OVA溶液腹腔注射及雾化吸入刺激。雾化过程中观察小鼠形态、活动变化等情况，每组均在最后一次雾化结束后立即行有创气道阻力检测；收集支气管肺泡灌洗液（BALF），统计其炎症细胞数及细胞分类比例；取肺组织行HE、过碘酸雪夫（PAS）染色，，光镜下观察气道结构及病理改变，并行病理半定量评分，判断气道炎症严重程度；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测BALF和血清中IL-17F浓度；采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）的标准曲线法，测定小鼠肺组织中IL-17F表达变化情况。使用SPSS16.0统计软件进行统计学分析。 结果致敏小鼠经OVA雾化激发过程中出现典型的动物哮喘发作症状。模型组小鼠气道阻力显著高于对照组和治疗组（P0.01）；BALF中细胞总数[（75.93±3.03）×104/ml]、嗜酸性粒细胞百分比[（19.02±2.01）%]、中性粒细胞百分比[（17.01±0.91）%]也有显著升高（P0.01）。雾化吸入灭活草分枝杆菌后，治疗组气道阻力下降（P0.01），气道内细胞总数[（59.41±2.73）×104/ml]、嗜酸性粒细胞百分比[（13.37±1.88）%]、中性粒细胞百分比[（13.87±0.93）%]均有不同程度降低（P0.01）。哮喘小鼠肺组织病理结果可见气道粘膜增厚，杯状细胞增生、排列紊乱并分泌大量粘液，管腔狭小；气道及血管周围组织水肿、炎症细胞浸润明显。治疗组中上述病理改变得到有效改善。小鼠BALF中IL-17F浓度均高于血清中IL-17F浓度；模型组BALF中IL-17F浓度[（183.04±14.03）pg/ml]明显高于对照组[（50.44±4.55）pg/ml]和治疗组[（114.36±7.93）pg/ml]，差异有统计学意义（P0.01）；治疗组BALF中IL-17F浓度较模型组有所减少，但仍高于对照组，差异有统计学意义（P0.01）。模型组[（9.20±2.41）pg/ml]和治疗组[（6.36±1.15）pg/ml]小鼠血清中IL-17F浓度高于对照组[（3.29±0.77）pg/ml]，差异有统计学意义（P0.01），治疗组小鼠血清中IL-17F浓度较模型组减少，但差异无统计学意义（P0.05）。模型组小鼠肺组织IL-17F mRNA的相对表达量显著高于对照组和治疗组（P0.01）。雾化吸入灭活草分枝杆菌治疗后小鼠哮喘模型肺组织IL-17F mRNA的表达与对照组相比差异无统计学意义（P0.05）。IL-17F在肺组织中的基因表达与BALF中嗜酸性粒细胞（r=0.710，p0.01）、中性粒细胞（r=0.818，p0.01）百分比成正相关。各浓度Mch（6.25mg/ml、12.5mg/ml、25mg/ml、50mg/ml）刺激后测定的气道阻力与模型组肺组织中IL-17F mRNA表达量成正相关，相关分析结果分别为：r=0.751，p0.01；r=0.695，p0.01；r=0.897，p0.01；r=0.934，p0.01。 结论哮喘小鼠模型气道炎症、AHR与IL-17F高表达有关，雾化吸入灭活草分枝杆菌能减轻哮喘小鼠模型气道炎症、下调IL-17F表达，并显著改善AHR，从而控制哮喘发作。
【关键词】：支气管哮喘 灭活草分枝杆菌 白细胞介素-17F 气道炎症 气道高反应性
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R562.25
【目录】：

• 中英文缩写对照表4-5
• 摘要5-7
• ABSTRACT7-11
• 前言11-15
• 材料和方法15-30
• 实验结果30-37
• 讨论37-43
• 小结43-44
• 参考文献44-50
• 综述50-73
• 参考文献64-73
• 致谢73-74
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文74

【参考文献】

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本文编号：309911