构建以Th17应答为主致气道中性粒细胞增高的小鼠哮喘模型

发布时间：2017-04-16 08:11

  本文关键词：构建以Th17应答为主致气道中性粒细胞增高的小鼠哮喘模型，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究背景和目的： 支气管哮喘是一种以气道高反应性、气道炎症细胞浸润、杯状细胞增生和气道重塑等为特征的过敏性疾病。免疫应答失衡是其众多发病机制中最重要的一种。以往研究表明，活化的CD4~+Th2细胞增多可致气道及血管周围嗜酸性粒细胞浸润，Th1/Th2免疫应答反应失衡也作为哮喘发病的主要原因广泛应用于临床和基础研究中。新近发现CD4~+T细胞家族新成员Th17细胞及其分泌的细胞因子IL-17可募集、趋化中性粒细胞致病原入侵部位，在宿主防御中发挥积极作用。近年来，国内外学者均在哮喘患者肺泡灌洗液及血清中发现较高水平IL-17。且重症哮喘患者和对糖皮质激素治疗抵抗者中气道以中性粒细胞浸润为主，嗜酸性粒细胞比例下降甚至未检出。Th17免疫应答增强或许是哮喘发病的新机制。为此，本研究拟建立气道炎症以中性粒细胞浸润为主的小鼠哮喘模型，并初步探讨Th17免疫应答的作用。 方法： 1.腹腔致敏构建气道炎症以嗜酸性粒细胞浸润为主的经典小鼠哮喘模型，并鉴定。 2.经卵清蛋白（ovalbumin, OVA）孵化过夜的树突状细胞（dendriticcell, DC）与静息型T细胞共培养，加入脂多糖（LPS）刺激，检测T细胞的分化。 3.改进传统建模方法，增加气道滴入LPS+OVA致敏，从气道高反应性，肺组织T细胞分化，支气管肺泡灌洗液（BALF）炎症细胞分类，肺组织病理学观察等方面鉴定新模型。 结果： 1.经典小鼠哮喘模型构建成功：存在气道高反应性；气道周围炎症细胞浸润明显；BALF细胞沉淀分类见嗜酸性粒细胞增多，细胞因子IL-5水平显著升高。 2.共培养结果表明，OVA-DC可刺激静息型T细胞向Th2方向偏移；而LPS-OVA-DC可刺激静息型T细胞向Th17方向偏移。 3.在传统模型构建方法基础上增加气道给药LPS+OVA致敏，构建新小鼠哮喘模型：气道高反应性明显；气道与血管周围炎症细胞浸润；BALF细胞沉淀分类见中性粒细胞增多，细胞因子IL-17、IL-8、TNF-α增高更为显著。 结论： 1. LPS可使OVA-DC提呈抗原改变，，影响T细胞的分化方向。 2.增加气道滴加LPS+OVA致敏，可使体内静息型T细胞向Th17细胞方向偏移，从而诱导中性粒细胞在肺组织气道和血管周围浸润，影响哮喘小鼠部分病理特征。
【关键词】：哮喘模型 嗜酸性粒细胞 中性粒细胞 免疫应答
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R562.25;R-332
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-13
• 第一部分 构建气道炎症以嗜酸性粒细胞增高为主的传统哮喘模型13-24
• 1. 材料与方法13-18
• 2. 结果18-22
• 3. 讨论22-24
• 第二部分 LPS 对 OVA 处理的 DC 诱导静息型 T 细胞分化方向的影响24-31
• 1. 材料与方法24-26
• 2. 结果26-28
• 3. 讨论28-31
• 第三部分 构建气道炎症以中性粒细胞增高为主的新哮喘模型31-43
• 1. 材料与方法31-33
• 2. 结果33-40
• 3. 讨论40-43
• 全文结论43-44
• 参考文献44-47
• 文献综述47-53
• 参考文献51-53
• 致谢53-54
• 攻读硕士学位期间发表的文章和参加的学术活动54-55

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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  本文关键词：构建以Th17应答为主致气道中性粒细胞增高的小鼠哮喘模型，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：310379