TGF-β1/Notch-1/eIF3a信号通路在肺纤维化肺泡上皮细胞EMT进程中的作用机制研究
发布时间：2021-03-27 19:09
目的:阐明TGF-β1/Notch1/eIF3a信号通路是否参与了肺纤维化肺泡上皮细胞间质转分化（EMT）的进程,为肺纤维化（PF）发病机制提供新的理论依据,并为研发治疗肺纤维化的药物提供新思路。方法:1.动物实验雄性SD大鼠30只,随机分为正常对照（CON）组和博莱霉素（BLM）组,每组15只。通过气管内注射博莱霉素（7500 U/kg）的方法来建立大鼠的肺纤维化模型。CON组在相同环境下气管内注射相等体积（0.15ml/100g）生理盐水,造模后28天处死动物。10%中性福尔马林固定左肺,石蜡包埋,进行HE、Masson染色。提取右肺组织RNA或蛋白,real-time PCR和（或）Western Blot检测I型胶原（collagen I）、III型胶原（collagen III）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、E钙粘蛋白（E-Cadherin）、紧密连接蛋白-1（ZO-1）、波形蛋白（Vimentin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Jagged-1、Notch-1、HES-1、真核翻译起始因子3a（eIF3a）的表达。2.细胞实验第一部分:Notch1抑制剂DAP...
【文章来源】：皖南医学院安徽省
【文章页数】：100 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
博莱霉素对大鼠肺组织形态学的影响（HE染色，200×）
皖南医学院硕士学位论文.26图2博莱霉素对大鼠肺组织胶原变化的影响（Masson染色，200×）（A、B、C为对照组，D、E、F为模型组）1.3博莱霉素上调大鼠肺组织中collagenⅢ的表达RealtimePCR结果发现大鼠肺组织中collagenⅢmRNA表达水平由CON组的（1.0890.504）上调至BLM组的（5.5360.746）（P<0.01），且分析熔解曲线发现collagenⅢ只有一个扩增产物峰，说明在此条件下，collagenⅢ基因扩增具有特异性（图3，图4）。另外WesternBlot结果发现collagenⅢ蛋白表达水平由CON组的（0.6050.026）明显上调至BLM组的（0.9970.055）（P<0.01）（图5）。表明肺纤维化大鼠肺组织中collagenⅢ的表达明显升高。图3博莱霉素对大鼠肺组织中collagenIIImRNA表达的影响（sx,n=8.**P<0.01vs.CON）
皖南医学院硕士学位论文.26图2博莱霉素对大鼠肺组织胶原变化的影响（Masson染色，200×）（A、B、C为对照组，D、E、F为模型组）1.3博莱霉素上调大鼠肺组织中collagenⅢ的表达RealtimePCR结果发现大鼠肺组织中collagenⅢmRNA表达水平由CON组的（1.0890.504）上调至BLM组的（5.5360.746）（P<0.01），且分析熔解曲线发现collagenⅢ只有一个扩增产物峰，说明在此条件下，collagenⅢ基因扩增具有特异性（图3，图4）。另外WesternBlot结果发现collagenⅢ蛋白表达水平由CON组的（0.6050.026）明显上调至BLM组的（0.9970.055）（P<0.01）（图5）。表明肺纤维化大鼠肺组织中collagenⅢ的表达明显升高。图3博莱霉素对大鼠肺组织中collagenIIImRNA表达的影响（sx,n=8.**P<0.01vs.CON）
【参考文献】：
期刊论文
[1]吴茱萸次碱通过抑制Notch1/eIF3a信号通路保护博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化[J]. 高云星,蒋莉莉,张倩,左东泽,李先伟. 中国中药杂志. 2018(17)
[2]新风胶囊通过调节肺泡Ⅱ型上皮细胞Notch/Jagged-HES轴改善佐剂性关节炎大鼠肺功能[J]. 万磊,刘健,黄传兵,张皖东,齐亚军,张晓军. 细胞与分子免疫学杂志. 2017(07)
[3]Notch signaling mediated by TGF-β/Smad pathway in concanavalin A-induced liver fibrosis in rats[J]. Yi Wang,Ruo-Wu Shen,Bing Han,Zhen Li,Le Xiong,Feng-Yu Zhang,Bei-Bei Cong,Bei Zhang. World Journal of Gastroenterology. 2017(13)
[4]The Notch-Hes pathway in mammalian neural development[J]. KAGEYAMA RYOICHIRO; TOSHIYUKI OHTSUKA(Institute for Virus Research, Kyoto University, Sakyo-ku,Kyoto 606-8507 Japan). Cell Research. 1999(03)
本文编号：3104050
【文章来源】：皖南医学院安徽省
【文章页数】：100 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
博莱霉素对大鼠肺组织形态学的影响（HE染色，200×）
皖南医学院硕士学位论文.26图2博莱霉素对大鼠肺组织胶原变化的影响（Masson染色，200×）（A、B、C为对照组，D、E、F为模型组）1.3博莱霉素上调大鼠肺组织中collagenⅢ的表达RealtimePCR结果发现大鼠肺组织中collagenⅢmRNA表达水平由CON组的（1.0890.504）上调至BLM组的（5.5360.746）（P<0.01），且分析熔解曲线发现collagenⅢ只有一个扩增产物峰，说明在此条件下，collagenⅢ基因扩增具有特异性（图3，图4）。另外WesternBlot结果发现collagenⅢ蛋白表达水平由CON组的（0.6050.026）明显上调至BLM组的（0.9970.055）（P<0.01）（图5）。表明肺纤维化大鼠肺组织中collagenⅢ的表达明显升高。图3博莱霉素对大鼠肺组织中collagenIIImRNA表达的影响（sx,n=8.**P<0.01vs.CON）
皖南医学院硕士学位论文.26图2博莱霉素对大鼠肺组织胶原变化的影响（Masson染色，200×）（A、B、C为对照组，D、E、F为模型组）1.3博莱霉素上调大鼠肺组织中collagenⅢ的表达RealtimePCR结果发现大鼠肺组织中collagenⅢmRNA表达水平由CON组的（1.0890.504）上调至BLM组的（5.5360.746）（P<0.01），且分析熔解曲线发现collagenⅢ只有一个扩增产物峰，说明在此条件下，collagenⅢ基因扩增具有特异性（图3，图4）。另外WesternBlot结果发现collagenⅢ蛋白表达水平由CON组的（0.6050.026）明显上调至BLM组的（0.9970.055）（P<0.01）（图5）。表明肺纤维化大鼠肺组织中collagenⅢ的表达明显升高。图3博莱霉素对大鼠肺组织中collagenIIImRNA表达的影响（sx,n=8.**P<0.01vs.CON）
【参考文献】：
期刊论文
[1]吴茱萸次碱通过抑制Notch1/eIF3a信号通路保护博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化[J]. 高云星,蒋莉莉,张倩,左东泽,李先伟. 中国中药杂志. 2018(17)
[2]新风胶囊通过调节肺泡Ⅱ型上皮细胞Notch/Jagged-HES轴改善佐剂性关节炎大鼠肺功能[J]. 万磊,刘健,黄传兵,张皖东,齐亚军,张晓军. 细胞与分子免疫学杂志. 2017(07)
[3]Notch signaling mediated by TGF-β/Smad pathway in concanavalin A-induced liver fibrosis in rats[J]. Yi Wang,Ruo-Wu Shen,Bing Han,Zhen Li,Le Xiong,Feng-Yu Zhang,Bei-Bei Cong,Bei Zhang. World Journal of Gastroenterology. 2017(13)
[4]The Notch-Hes pathway in mammalian neural development[J]. KAGEYAMA RYOICHIRO; TOSHIYUKI OHTSUKA(Institute for Virus Research, Kyoto University, Sakyo-ku,Kyoto 606-8507 Japan). Cell Research. 1999(03)
本文编号：3104050
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