维生素D抑制肺纤维化发生的体内外研究

发布时间：2021-04-11 13:31

　　目的:研究维生素D对肺纤维化的影响及相关机制,为肺纤维化的防治提供新思路。方法:本研究主要包括三个部分:第一部分通过生长转化因子β（TGF-β）诱导细胞发生上皮间质转化（EMT）构建细胞纤维化模型,通过细胞形态学及Western blot检测相关蛋白的表达情况确定造模是否成功。第二部分主要研究1,25-（OH）2D3对TGF-β引起细胞上皮间质转化的影响。第一部分结果显示,分别以5 ng/ml和10 ng/ml TGF-β可以引起A549细胞和BEAS-2B细胞发生上皮间质转化。通过CCK-8和前期实验结果确定维生素D（1,25-（OH）2D3）的剂量分别为10 n M和50 n M。实验分为四组:空白对照组、TGF-β组、维生素D组、TGF-β和维生素D联合处理组。通过细胞划痕实验分析细胞的迁移能力,Transwell实验分析细胞的侵袭能力、流式细胞仪检测细胞的抗凋亡能力、免疫荧光了解E-cad、Vimentin、VDR表达位置和表达量的改变情况,Western blot检测E-cad、Vimentin、β-catenin、Snail、Slug、VDR的表达情况,RT-PCR检测纤维... 

【文章来源】：苏州大学江苏省

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

肺组织损伤修复的四个阶段

图 2 EMT 形态学及标志蛋白改变在组织损伤修复和上皮间质转化过程中, TGF-β 均起着重要作用。TGF-β 是一种具有多种功能的细胞因子，他通过影响细胞增生、分化、凋亡和产生细胞外基质来调节组织形态和功能[6]。研究表明在各种纤维化疾病的动物模型中 TGF-β 含量升高[7-9]

TGF-β处理A549细胞发生形态学改变(100X)

【参考文献】：
期刊论文
[1]Snail基因修饰对骨髓基质干细胞骨架结构稳定作用及促迁移和对无血清培养诱导细胞凋亡的保护作用研究[J]. 查运红,梅元武,毛玲,贺杰峰,殷涛,张立,王全胜.  生物工程学报. 2007(04)



本文编号：3131340