CSD肽对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的干预作用及机制研究

发布时间：2017-04-20 19:21

本文关键词：CSD肽对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的干预作用及机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：采用博来霉素（bleomycin，BLM）诱导的小鼠肺纤维化模型,观察CSD肽（caveolin-1scaffolding domain peptide）对肺纤维化的干预作用，并初步探讨其干预肺纤维化形成的相关机制，为以窖蛋白-1（caveolin-1，Cav-1）为分子靶点治疗特发性肺纤维化提供理论依据。方法：按照随机数表法将18只小鼠分为3组：正常对照组（Cont组）、BLM模型组（BLM组）和CSD肽干预组（CSD组），每组6只。采用气管内单次灌注BLM法建立小鼠肺纤维化模型，BLM组和CSD组均给予BLM（3.5mg/kg，0.05m1），Cont组给予等体积生理盐水（0.05m1）。造模后，CSD组腹腔注射CSD肽（0.15mM，0.1ml)，，BLM组和Cont组腹腔注射等量生理盐水（0.1ml），每天1次。各组于造模后第14d处死小鼠，留取肺组织标本，制作病理组织切片，观察肺组织炎症和纤维化的情况；测定肺组织羟脯氨酸（hydroxyproline，HYP）含量了解肺纤维化的程度；免疫组化检测Cav-1的表达；免疫印迹（Western Blot）检测Cav-1、膜PTEN、胶原1α1（collagen1alpha1，Col1α1）、α-平滑肌肌动蛋白（alpha smooth muscle actin，α-SMA）和E-钙粘蛋白（E-cadherin，E-cad）的表达。结果： 1、肺组织病理学改变：肺组织病理学检测表明肺纤维化模型成功建立。与Cont组比较，BLM组小鼠肺组织肺泡炎、肺纤维化的分级评分明显增加（P0.01、P0.01）；与BLM组比较，CSD组肺组织的肺泡炎、肺纤维化分级评分明显减少（P0.01、P0.05）。 2、肺组织HPY含量检测：与Cont组比较，BLM组小鼠肺组织HPY含量明显增加（P0.01）；与BLM组比较，CSD组肺组织的HPY含量减少（P0.05）。 3、肺组织免疫组织化学检测：与Cont组比较，BLM组小鼠肺组织Cav-1的表达明显减少（P0.01）；与BLM组比较，CSD组Cav-1的表达稍增加，但差异无统计学意义（P0.05）。 4、肺组织Western Blot检测：与Cont组比较，BLM组小鼠肺组织Cav-1表达明显降低（P0.01），与BLM组比较，CSD组Cav-1表达稍增加，但差异无统计学意义（P0.05）。与Cont组比较，BLM组小鼠肺组织膜PTEN、E-cad表达均降低（P0.05、P0.01），与BLM组比较，CSD组膜PTEN、E-cad表达均增加（P0.01、P0.05）。与Cont组比较，BLM组小鼠肺组织Col1α1、α-SMA表达均明显增加（P0.01、P0.01），与BLM组比较，CSD组Col1α1、α-SMA表达均明显降低（P0.01、P0.01）。结论： 1、气管内单次灌注BLM3.5mg/kg可以成功诱导小鼠肺纤维化。 2、腹腔注射CSD肽对BLM致小鼠肺纤维化的形成具有干预作用。 3、CSD肽干预肺纤维化的形成，其机制可能与以下途径有关：（1）CSD肽通过恢复Cav-1的功能，上调膜PTEN的表达；（2）膜PTEN表达的上调，可能通过抑制其下游信号通路如PI3K/Akt，进而抑制上皮细胞-间充质转化，降低细胞外基质的合成，干预肺纤维化的形成。
【关键词】：博来霉素 肺纤维化 窖蛋白-1 PTEN 上皮细胞-间充质转化
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R563.9
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