下呼吸道感染常见致病菌基因诊断的研究

发布时间：2021-06-16 22:08

　　目的：根据DNA分子碱基互补配对的原理和不同来源、具有互补序列的单链DNA在一定条件下可以形成异源双链DNA的特性，建立了一种利用病原菌特异长链DNA探针直接检测生物素标记细菌DNA的斑点杂交技术，以快速检测下呼吸道感染的常见致病菌。并将该方法应用于临床痰样本的检测，同时与痰培养和聚合酶链反应方法进行比较，探讨该方法在下呼吸道感染诊断中的应用价值。方法：1．选择肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌、甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌、甲氧西林敏感表皮葡萄球菌、甲氧西林耐药表皮葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希菌、嗜肺军团菌这10种下呼吸道感染最常见的病原菌，作为检测菌株。在这10种病原菌高度特异的基因序列内利用聚合酶链反应合成上述10种细菌特异的长链DNA探针，并将合成的特异探针固定在硝酸纤维素膜上，与用长臂光敏生物素标记后的模板DNA进行斑点杂交反应，通过观察杂交信号判断存在何种细菌感染，同时研究该方法的敏感性和特异性。2．利用上述斑点杂交方法检测100份社区获得性肺炎患者、150份医院获得性肺炎患者和50份非下呼吸道感染患者的痰标本，观察其检测结果，并与培养法... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
缩略词对照表（Abbreviation Index）
中文摘要（Abstract in Chinese）
英文摘要（Abstract in English）
前言（Introduction）
第一部分 斑点杂交的实验研究
    材料（Materials）
    方法（Methods）
    结果（Results）
第二部分 斑点杂交的临床应用研究
    材料（Materials）
    方法（Methods）
    结果（Results）
讨论（Discussion）
结论（Conclusion）
研究意义和展望（Significance and Prospects）
参考文献（References）
综述（Review）
攻读学位期间发表论文（Published paper）
致谢（Acknowledgements）


【参考文献】：
期刊论文
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[2]中国医院和社区获得性感染革兰阳性球菌耐药性监测研究[J]. 李家泰,李耘,王进.  中华医学杂志. 2003(05)
[3]中国重症监护病房革兰阴性菌耐药性连续7年监测研究[J]. 陈民钧,王辉.  中华医学杂志. 2003(05)
[4]探针的纯化与否对基因芯片重复利用的影响[J]. 张宝,马文丽,石嵘,吴清华,郑文岭.  第一军医大学学报. 2002(03)
[5]下呼吸道感染诊断治疗进展[J]. 何礼贤.  中国医师杂志. 2001(07)
[6]我国肺部感染研究现状与思考[J]. 何礼贤,邓伟吾.  中华结核和呼吸杂志. 2001(06)
[7]PCR结合寡核苷酸探针杂交检测临床常见真菌的实验研究[J]. 黄媛,牟兆钦,陈建魁,尹秀云.  中华微生物学和免疫学杂志. 2001(03)
[8]长臂光敏基因探针对结核性浆膜腔积液的诊断价值[J]. 王卫华,肖红,肖勇,符志军.  中华检验医学杂志. 2001(02)
[9]rDNA探针杂交检测病人痰标本中结核杆菌的研究[J]. 张灵霞,庄玉辉,杨华卫,李邦印,夏湘萱.  中国防痨杂志. 2000(03)
[10]两种DNA探针杂交检测结核分支杆菌方法的研究[J]. 杨华卫,杨树德,庄玉辉,李国利,李邦印.  微生物学报. 2000(02)



本文编号：3233879