内皮祖细胞体外移植及他汀类药物对大鼠急性肺损伤的保护作用及疗效比较

发布时间：2021-07-20 12:54

　　目的:探索细胞疗法暨内皮祖细胞（EPCs）移植法对急性肺损伤的治疗作用,比较体外移植内皮祖细胞、使用阿托伐他汀提高循环中内皮祖细胞数量和活性以及二者联合应用三种方法的疗效。方法:取人脐带血分离内皮祖细胞,经一周培养;用脂多糖（LPS）造大鼠急性肺损伤（ALI）模型,分别口服给予阿托伐他汀、尾静脉注入BrdU标记的内皮祖细胞及两者联合给药。2日后评估其肺损伤的程度、肺血管诱生型一氧化氮合酶（iNOS）的蛋白表达及免疫组化法追踪移植内皮祖细胞修复血管内皮的情况。结果:EPCs移植组和联合治疗组中,免疫组化可检测到肺血管内皮BrdU呈阳性的移植EPCs;大鼠肺动脉中iNOS表达较LPS模型组受到抑制;肺实质中,中性粒细胞（PMN）明显减少,肺水含量、透明膜形成及肺出血均减少。而他汀治疗组与LPS模型组未见明显差异。结论:EPCs体外移植对ALI大鼠模型的肺血管内皮有保护作用,同时也维持了肺泡毛细血管屏障的完整性。而阿托伐他汀对移植EPCs有协同作用,联合应用将会取得更好的疗效。而单独的他汀药物治疗未见明显疗效。 

【文章来源】：大连医科大学辽宁省

【文章页数】：41 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

EPCs体外培养第4天（x100）

结 果1.内皮祖细胞的鉴定细胞形态学观察见：从新鲜脐血中分离到的单个核细胞呈小圆形(图1），分离培养48小时后贴壁，4、5d生长速度最快，出现大量的梭形贴壁细胞（图2）。约6d，可见大量的细胞团形成，细胞首尾相连，有时还可见两排细胞平行排列成管样结构，约7d可见细胞呈簇状分布，并见片状融合，类似铺路石（图3）。免疫荧光法鉴定：内皮祖细胞表面 标记物vWF、CD133免疫荧光检测呈阳性，荧光显微镜下细胞膜和胞浆中可见黄绿色荧光（图4、5）。流式细胞仪检测EPC表面标志物CD34呈阳性

类似铺路石（图3）。免疫荧光法鉴定：内皮祖细胞表面 标记物vWF、CD133免疫荧光检测呈阳性，荧光显微镜下细胞膜和胞浆中可见黄绿色荧光（图4、5）。流式细胞仪检测EPC表面标志物CD34呈阳性，约为26％（图6)。图1：脐血提取的单个核细胞 第1天 （x100）图2：EPCs体外培养 第4天 （x100）

【参考文献】：
期刊论文
[1]脐血内皮祖细胞移植改善肢体缺血的研究[J]. 杨晨,张志华,卢士红,杨仁池,钱冠清,韩忠朝.  中华医学杂志. 2003(16)



本文编号：3292863