硫化氢对蝮蛇毒致大鼠急性肺损伤肺组织细胞凋亡的影响及可能机制

发布时间：2017-04-30 13:04

  本文关键词：硫化氢对蝮蛇毒致大鼠急性肺损伤肺组织细胞凋亡的影响及可能机制，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的 通过观察增减机体内H2S的含量对蝮蛇毒致SD大鼠急性肺损伤时肺组织细胞凋亡及凋亡相关通路蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-9、Caspase-3表达的影响，探讨H2S/CSE体系对蝮蛇毒致急性肺损伤时肺组织细胞凋亡的影响及其机制。 方法 健康清洁级SD（sprague-dawley）雄性大鼠36只，采用完全随机分组法分6组，每组6只：生理盐水空白对照组（N组，注射用生理盐水2ml/kg），蛇毒组（C组，蛇毒1.50mg/kg），蛇毒+低剂量NaHS组（L组，蛇毒1.50mg/kg+NaHS0.78mg/kg），蛇毒+中剂量NaHS组（M组，蛇毒1.50mg/kg+NaHS1.56mg/kg），蛇毒+高剂量NaHS组（H组，蛇毒1.50mg/kg+NaHS3.12mg/kg），蛇毒+PPG组（P组，蛇毒1.50mg/kg+PPG30mg/kg）。按照实验分组分别予以腹腔内注射生理盐水及腹蛇毒素，3小时后按分组分别腹腔内注射NaHS及PPG。于注射蝮蛇毒素6小时后处死大鼠，采集肺组织标本。病理切片HE染色光镜下评估肺组织病理学变化并进行肺损伤病理评分，流式细胞术测各组肺组织细胞凋亡率，免疫组织化学法测Bcl-2和Bax蛋白分布和表达，，免疫印迹法测Caspase-9和Caspase-3蛋白表达。 结果 1.肺组织病理学改变 （1）大体观：N组肺组织颜色呈淡粉红色，表面光滑，无出血点，无水肿。C组可见肺组织明显充血水肿，外观呈红色，见大片的暗红色出血灶。L组、M组以及H组见肺组织充血水肿依次缓解。P组损伤程度较C组严重，肺组织外观呈红色，大片新鲜出血病灶，肺组织严重充血水肿。 （2）镜下观：N组肺泡无水肿及透明膜形成，肺间质不增宽，肺泡腔及肺间质未见红细胞漏出及炎症细胞侵润，无肺不张。C组可见肺泡结构明显紊乱、破坏，肺泡结构不完整，明显肺泡水肿，大量透明膜形成，肺间质明显增厚，肺间质及肺泡大量红细胞及粒细胞侵润，大面积肺不张，与N组比较，其肺损伤评分明显升高（P0.01）。L组与C组比较，肺组织损伤尚未见明显改善，肺损伤评分无统计学意义。M组及H组肺组织结构较C组破坏程度明显减轻，肺泡及肺间质水肿减轻，红细胞和粒细胞渗出明显减少，透明膜减少，肺不张面积减小，肺损伤评分均明显降低（P0.01）。P组肺组织损伤程度较C组更严重，表现为大面积肺泡水肿，大量透明膜形成，肺泡结构大面积破坏，肺间质增厚，大量红细胞和粒细胞渗出，大面积肺不张，肺损伤评分明显升高（P0.05）。 2.细胞凋亡率的变化 与N组比较，其余各处理组肺组织细胞凋亡率均明显升高（P0.01）。与C组比较，L、M、H组细胞凋亡率均明显下降（P0.01）；P组肺组织凋亡率明显升高（P0.01）。 3.肺组织Bax和Bcl-2蛋白的分布和表达以及Bcl-2/Bax比值的变化 Bax和Bcl-2蛋白表达阳性被染色呈棕黄色，主要表达于肺泡上皮和支气管上皮，于血管内皮细胞及炎症细胞内亦有表达。N组可见少量Bax和Bcl-2蛋白阳性表达。与N组比较，C组Bcl-2蛋白的表达增强（P0.01），Bax蛋白表达明显增强（P0.01），Bcl-2/Bax比值明显降低（P0.01）。与C组比较， L、M、H组Bcl-2蛋白表达均明显增强（P0.01）；而M、H组Bax蛋白表达则明显减少（P0.01）；L、M、H组Bcl-2/Bax比值明显升高（P0.01或P0.05）。与C组比较，P组Bcl-2蛋白表达明显减弱（P0.05），Bax蛋白表达明显增加（P0.05），Bcl-2/Bax比值明显下降（P0.05）。 4.肺组织Caspase-3及Caspase-9蛋白表达的变化 N组有Caspase-3及Caspase-9蛋白表达。与N组比较，C组Caspase-3及Caspase-9蛋白表达明显增加（P0.01）。与C组比较，L、M、H组Caspase-3蛋白表达均明显减弱（P0.01），M、H组Caspase-9蛋白表达亦明显减弱（P0.01）；P组Caspase-3和Caspase-9蛋白表达均明显增强（P0.01或P0.05）。 结论 1.蝮蛇毒可以导致SD大鼠产生急性肺损伤。 2.蝮蛇毒致SD大鼠急性肺损伤时，肺组织细胞凋亡率明显上升。 3. H2S可以抑制蝮蛇毒致SD大鼠急性肺损伤时肺组织细胞凋亡，对急性肺损伤起到保护作用。其机制可能与上调Bcl-2蛋白表达，下调Bax、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达有关。
【关键词】：急性肺损伤 蝮蛇毒 细胞凋亡 硫化氢
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R563
【目录】：

• 英文缩略词表4-5
• 中文摘要5-8
• Abstract8-11
• 前言11-13
• 实验材料和实验方法13-20
• 1. 实验材料13-14
• 2. 实验动物分组及建模14-15
• 3. 检测指标及方法15-19
• 4. 统计学处理19-20
• 结果20-29
• 1. 实验大鼠肺组织病理学变化20-22
• 2. 各组肺组织细胞凋亡率的变化22-24
• 3. 各组肺组织 Bax 和 Bcl-2 蛋白的分布和表达的变化24-27
• 4. 各组肺组织 Caspase-3 及 Caspase-9 蛋白表达的变化27-29
• 讨论29-35
• 结论35-36
• 参考文献36-40
• 综述40-50
• 参考文献46-50
• 研究生期间论文发表及获奖情况50-51
• 致谢51

【共引文献】

中国硕士学位论文全文数据库 前3条

1 吕晨光;K_ATP通道阻断剂格列苯脲对失血性休克大鼠肺损伤的影响[D];大连医科大学;2011年

2 高广荣;低温复苏对失血性休克大鼠肺组织PPAR-γ及相关基因表达的影响[D];大连医科大学;2011年

3 崔红;密闭舱室大鼠爆炸伤合并失血性休克特点与容量复苏的研究[D];第三军医大学;2010年

  本文关键词：硫化氢对蝮蛇毒致大鼠急性肺损伤肺组织细胞凋亡的影响及可能机制，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：336880