香烟抽提物对MUC5AC表达的影响及信号转导机制

发布时间：2021-08-29 08:11

　　目的:观察香烟抽提物对气道上皮细胞黏蛋白（Mucin）5AC表达的影响及其信号转导机制。方法:（1）体外培养人气道上皮细胞系A549细胞,予以不同浓度的香烟抽提物（CSE）刺激24 h,观察刺激前后细胞的生长和增殖情况,并分别采用ELISA技术及PCR检测各组细胞中MUC5AC蛋白含量及转录水平的变化情况,测定活性氧成分的含量。（2）以未予任何处理的细胞为空白对照,分别设立CSE单纯刺激组;肿瘤坏死因子转换酶抑制剂-1（TAPI-1）预处理组;活性氧清除剂DMTU预处理组。各孵育24 h后,采用RT-PCR检测处理前后细胞中MUC5AC mRNA含量;ELISA检测培养上清中MUC5AC、可溶性转化生长因子（TGF）-α蛋白含量;Western印迹分析磷酸化表皮生长因子（p-EGFR）、磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）、磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）蛋白水平。（3）分别以JNK特异性抑制剂SP600125、Src激酶的特异性抑制剂PP2、活性氧清除剂DMTU为干预条件。采用RT-PCR技术检测干预前后细胞中黏蛋白MUC5AC转录水平的改变、ELISA测定培养上清液中M... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

未予CSE刺激的A549细胞（×200）

图 1-2 未予 CSE 刺激的 A549 细胞（×200） 图 1-3 CSE刺激24h后的 A549细胞（×200）Fig 1-2 A549 cells before stimulation （×200） Fig 1-3 A549 cells treated with CSE 24hours later （×200）00.10.20.30.40.50.60.70.80.91正常对照 5%CSE 10%CSE 20%CSECSE刺激前后各相关指标的变化ROS MUC5AC protein MUC5AC mRNA图 1-4 CSE 刺激前后各相关指标的变化Fig 1-4 The levels of Mucin expression andROS content after dilutions of CSE stimuliCSE刺激后细胞生长曲线00.10.20.30.40.50.60.70.80.914h 8h 12h 24h时间(h)光吸值A()normal 5%CSE 10%CSE20%CSE 30%CSE 40%CSE

CSE刺激前后MUC5ACmRNA变化

【参考文献】：
期刊论文
[1]慢性阻塞性肺疾病患者气道粘蛋白分子表型的研究[J]. 周向东,童瑾,兰箭.  中华结核和呼吸杂志. 2002(07)



本文编号：3370259