趋化因子CXCL12可能参与白细胞介素17A对小鼠肺成纤维细胞的活化

发布时间：2021-09-01 12:36

　　目的:研究IL-17A促进小鼠肺成纤维细胞活化及趋化因子CXCL12在其中的作用。方法:以雄性BALB/c小鼠为研究对象,小鼠腹腔注射重组小鼠IL-17A后取小鼠肺组织。采用实时逆转录PCR和蛋白质印迹法检测小鼠肺组织α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原蛋白的mRNA和蛋白表达,采用免疫组织化学法和实时逆转录PCR法测定肺组织中趋化因子CXCL12的表达。分离培养正常小鼠原代肺成纤维细胞,采用免疫荧光染色法和光学显微镜观察鉴定原代肺成纤维细胞。将分离的肺成纤维细胞与不同浓度的重组小鼠IL-17A共培养后收集细胞及上清液,采用实时逆转录PCR法测定细胞中α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白和CXCL12的mRNA水平,采用ELISA法测定培养上清液中Ⅰ型胶原蛋白和CXCL12蛋白水平。结果:与对照组比较,重组小鼠IL-17A处理后小鼠肺组织中α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白的mRNA和蛋白水平均升高（均P<0.01）。与不同浓度的重组小鼠IL-17A共培养后,小鼠肺成纤维细胞表达α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白和CXCL12的mRNA明显增加（均P<0.01）,其培养基上清液中Ⅰ型胶原蛋白、CXCL... 

【文章来源】：浙江大学学报(医学版). 2020,49(06)北大核心CSCD

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【部分图文】：

IL-17A组和对照组肺组织中Ⅰ型胶原蛋白和α平滑肌肌动蛋白表达的电泳图

小鼠原代肺成纤维细胞分离培养至1周左右,可见成纤维细胞呈长梭形、纺锤状或星形,细胞核呈卵圆形(图4A)。免疫荧光法标记蛋白鉴定结果,分离培养的梭形细胞胞质表达Vimentin阳性,细胞核DAPI染色呈卵圆形(图4B～D)。形态学和免疫荧光染色均证实为小鼠肺成纤维细胞。图3 IL-17A组和对照组小鼠肺组织中CXCL12的表达

IL-17A组和对照组小鼠肺组织中CXCL12的表达


本文编号：3376993