芒柄花素-7-丹酚酸酯抗肺纤维化的作用及其机制研究

发布时间：2021-09-12 12:10

　　目的:肺纤维化（pulmonary fibrosis,PF）是一种由遗传因素、环境因素、衰老因素和表观遗传等相互作用导致肺泡上皮细胞和成纤维细胞发生深刻变化的疾病,病死率高,无有效的治疗药物。项目组前期药理活性筛选发现黄芪中的芒柄花素（Formononetin,FM）和丹参中的丹参素（Danshensu,DS）具有明显抗肺纤维化的作用。但是芒柄花素水溶性差、生物利用度低、显效慢;而丹参素化学稳定性差,易氧化、变色,从而限制了它们在临床上的应用。因此项目组运用天然产物化学技术制备得到新的化合物命名为芒柄花素-7-丹酚酸酯（简称FS）,经合成后其稳定性及药理活性明显优于单体。其作用机制可能与抑制肺肌成纤维细胞的分化、增殖和迁移相关。研究肺纤维化发生的分子机制中发现长链非编码能够参与调控肌成纤维细胞。本项目拟研究FS的抗肺纤维化作用及其调控机制,将FS开发为治疗肺纤维化的新药物;同时为发掘lncITPF作为肺纤维化新的基因治疗靶点提供理论和实验数据的支持,具有重大的临床应用价值。方法:运用天然产物化学技术制备得到新的化合物命名为芒柄花素-7-丹酚酸酯（简称FS）。采用正辛醇-水分配体系对其进... 

【文章来源】：滨州医学院山东省

【文章页数】：89 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

芒柄花素一7一丹酚酸酷(FS)

Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ分析表明，与ＴＧＦ－Ｐ１相比，芒柄花素，丹参素，芒柄花素??＋丹参素和ＦＳ均能增加Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的表达水平，降低ｖｉｍｅｎｔｉｎ、ａ－ＳＭＡ和Ｓｎａｉｌ??的表达水平，且ＦＳ的作用是最显著的（图３－３Ａ）。为了验证这一结论，我们分析??了?Ｌ９２９细胞中胶原纤维形成的生理指标。芒柄花素，丹参素，芒柄花素＋丹参素??和ＦＳ能够降低Ｌ９２９细胞中胶原蛋白Ｉ型和ＩＩＩ型，波形蛋白和ａ－ＳＭＡ的表达水??平。这些发现与Ａ５４９细胞中检测结果一致（图３－３Ａ）。肺纤维化过程中另一常??见现象是细胞形状从不规则形状转变为长梭形。免疫荧光分析显示ＦＳ可以预防这??种现象的发生（图３－３Ｂ）。??Ａ?Ａ５４９?Ｂ?Ｌ９２９??１００－１?１００－??ｇ?８。＿?麵?！?８０－?．．??Ｉ?６０－?ｒ＾－｜?Ｈ｜?１?６０－??４０－?４０－??ＩＩ?ｍｉｌ?ＩＩ?１１?ｅｌｌ，１１??０?２．５?５?１０?２０?０?２．５?５?１０?２０??ＦＳ（?ｐｇ／ｍｌ）?ＦＳ（?ｐｇ／ｍｌ）??图３－１．?ＦＳ有效浓度的筛选。首先将细胞用５？ｇ／ｍＬＴＧＦ－ｐ丨给药７２小时，然后用０，２．５，５，１０，２０??狀／ｍＬ?ＦＳ共同处理４８小时。与仅用ＴＧＦ－ｐ丨处理的细胞相比，Ａ５４９?（Ａ）和Ｌ９２９?（Ｂ）细胞中??最明显的抑制作用为１０／／ｇ／ｍＬＦＳ。每个条形柱代表平均值土ＳＤ

Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ分析表明，与ＴＧＦ－Ｐ１相比，芒柄花素，丹参素，芒柄花素??＋丹参素和ＦＳ均能增加Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的表达水平，降低ｖｉｍｅｎｔｉｎ、ａ－ＳＭＡ和Ｓｎａｉｌ??的表达水平，且ＦＳ的作用是最显著的（图３－３Ａ）。为了验证这一结论，我们分析??了?Ｌ９２９细胞中胶原纤维形成的生理指标。芒柄花素，丹参素，芒柄花素＋丹参素??和ＦＳ能够降低Ｌ９２９细胞中胶原蛋白Ｉ型和ＩＩＩ型，波形蛋白和ａ－ＳＭＡ的表达水??平。这些发现与Ａ５４９细胞中检测结果一致（图３－３Ａ）。肺纤维化过程中另一常??见现象是细胞形状从不规则形状转变为长梭形。免疫荧光分析显示ＦＳ可以预防这??种现象的发生（图３－３Ｂ）。??Ａ?Ａ５４９?Ｂ?Ｌ９２９??１００－１?１００－??ｇ?８。＿?麵?！?８０－?．．??Ｉ?６０－?ｒ＾－｜?Ｈ｜?１?６０－??４０－?４０－??ＩＩ?ｍｉｌ?ＩＩ?１１?ｅｌｌ，１１??０?２．５?５?１０?２０?０?２．５?５?１０?２０??ＦＳ（?ｐｇ／ｍｌ）?ＦＳ（?ｐｇ／ｍｌ）??图３－１．?ＦＳ有效浓度的筛选。首先将细胞用５？ｇ／ｍＬＴＧＦ－ｐ丨给药７２小时，然后用０，２．５，５，１０，２０??狀／ｍＬ?ＦＳ共同处理４８小时。与仅用ＴＧＦ－ｐ丨处理的细胞相比，Ａ５４９?（Ａ）和Ｌ９２９?（Ｂ）细胞中??最明显的抑制作用为１０／／ｇ／ｍＬＦＳ。每个条形柱代表平均值土ＳＤ


本文编号：3394201