谷胱甘肽硫转移酶M5通过p38MAPK/NF-κB途径下调肿瘤坏死因子α介导的人支气管上皮细胞炎症水平

发布时间：2021-11-10 10:25

　　目的探讨急性肺损伤炎症状态下谷胱甘肽硫转移酶M5（GSTM5）对人支气管上皮细胞16HBE炎症水平的影响及其可能的分子机制。方法肿瘤坏死因子α（TNF-α;10 ng/m L）诱导16HBE,建立急性肺损伤细胞炎症模型,分组处理如下:空白对照组、TNF-α组（TNF-α）、GSTM5组（GSTM5+TNF-α）、阴性对照组（阴性对照质粒+TNF-α）。GSTM5组及阴性对照组分别采用脂质体Lipofectamine2000转染导入GSTM5-GFP质粒及阴性对照质粒;酶联免疫吸附试验检测各组细胞上清液中IL-6、IL-8、IL-10的含量,反转录聚合酶链反应检测NF-κB mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测NF-κB、P-NF-κB、p38、P-p38蛋白表达水平。结果荧光显微镜检查证实成功构建GSTM5-GFP真核表达质粒并转染成功。TNF-α诱导后,细胞培养上清液中IL-6、IL-8、IL-10浓度较空白对照组升高（P<0.05）,GSTM5组细胞上清液中IL-6、IL-8、IL-10均较TNF-α组降低（P<0.05）,差异有统计学意义;同时,TNF-α刺激后各组细胞... 

【文章来源】：中国呼吸与危重监护杂志. 2016,15(02)北大核心

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
材料与方法
    一、材料
    二、方法
    三、统计学处理
结果
    一、GSTM5 组、阴性对照组转染效率
    二、细胞培养上清液中IL-6、IL-8、IL-10 浓度
    三、NF-κB mRNA的表达
    四、P-NF-κB、NF-κB蛋白的表达
    五、P-p38、p38 蛋白的表达
讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]p38 MAPK信号通路在LPS诱导RAW264.7细胞表达sTREM-1中的作用[J]. 杜娟,高伟良,冯清州,刘晅.  中国呼吸与危重监护杂志. 2015(02)
[2]炎症介质在急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征发病机制中的作用[J]. 刘涛,任成山.  中华肺部疾病杂志(电子版). 2013(03)
[3]NF-κB p65基因在TNF-α诱导的肺泡上皮细胞氧化损伤中的作用[J]. 吴炜景,李理,袁伟锋,李伟峰,黄文杰.  中国呼吸与危重监护杂志. 2012(01)
[4]Induction of defence gene expression by oligogalacturonic acid requires in- creases in both cytosolic calcium and hydrogen peroxide in Arabidopsis thaliana[J]. Steven J NEILL.  Cell Research. 2004(03)



本文编号：3487102