大鼠原位肝移植术后急性肺损伤模型的建立以及绿茶多酚对肝移植术后急性肺损伤的保护作用研究

发布时间：2021-11-21 01:03

　　目的建立原位肝移植手术急性肺损伤的动物模型,并初步探讨肝移植所致成年大鼠急性肺损伤炎症反应的相关机制;观察绿茶多酚对大鼠原位肝移植术后急性肺损伤的影响。方法（1）建立成年大鼠原位肝移植术后急性肺损伤模型:健康雄性SD大鼠72只,随机分为两组:对照组（8只）和肝移植组（32对64只）。对照组进行麻醉和开腹手术,肝移植组进行肝移植手术,分别于手术完成后1h、4h、8h和12h处死大鼠。观察各组大鼠动脉血气变化,计算氧合指数（PaO₂/FiO₂）,测定肺系数、肺湿/干值、支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞（WBC）、中性粒细胞计数和总蛋白含量,HE染色观察肺组织病理学改变,BALF和血清中TNF-α,IL-1β、IL-8含量,肺组织和血清中MDA、SOD水平以及肺组织MPO水平。免疫组化法检测NF-κB蛋白的表达情况,以及WesternBlotting法检测各组肺组织TNF-α和IL-1β的表达情况。（2）应用第一部分建立的肺损伤模型,选取健康雄性SD大鼠40只,随机分为三组:对照组（8只）、肝移植组（8对）和绿茶多酚组（8对）,对照组进行麻醉和... 

【文章来源】：中国人民解放军医学院北京市

【文章页数】：93 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

TNF一a检测标准曲线

图15工L一lp检测标准曲线F中IL一8含量的测定用放射免疫分析(班A)方法，放免试剂盒购自中国人民解放军发中心放免研究所，严格按说明操作。本实验采用平衡法，取编号，按表6步骤操作。表6IL一SRIA检测加样程序(闪)试剂NSB5051一55样品缓冲液IL一8标准待测样品125IL一8200100一一一一100一_一一100100100100100

图16IL一8检测标准曲线P65免疫组化检测肺中叶用10%甲醛固定，常规切片。采用SABC免疫组化法染完成后干燥、封片，普通光镜下观察。一忍P65免疫组化方法:S妞C法(具体步骤如下)1)切片:将小鼠肺组织石蜡块连续切片，厚度为sum。2)切片脱蜡:二甲苯常规脱蜡2次，每次10min。脱蜡后切片，90%，80%，70%乙醇中各smin，PBS漂洗2次，每次smin。)每张切片滴加0.3%H20250川，室温下孵育10min，以灭活酶，PBS漂洗3次，每次smin。4)热修复抗原:

【参考文献】：
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本文编号：3508446