IL-4受体拮抗体对哮喘小鼠气道炎症及Th失衡干预作用的实验研究
发布时间：2022-01-14 02:30
第一部分:一种改良型小鼠哮喘模型的建立及评价哮喘动物模型一直是哮喘研究的重要手段和工具,也是本研究的重要基础和平台。为此我们选择遗传背景清楚,所需试剂易购价廉的BALB/c小鼠建立哮喘模型。结合文献报道,通过控制实验动物条件、改良致敏剂及致敏方法等,摸索出一种新的、效果良好的小鼠哮喘模型建立方法,为后续研究提供很好的工具和手段。目的:建立一种改良型小鼠哮喘模型并评价其效果。方法: SPF级雌性BALB/c小鼠20只,随机分为模型组和对照组,模型组于第0和14d（腹腔+皮下）注射100μg OVA（卵清蛋白）致敏,第21～30d雾化吸入5% OVA激发,对照组则用生理盐水替代。结果:模型组小鼠在激发过程中出现明显呼吸加深加快,点头呼吸,安静少动,弓背直立,二便失禁等哮喘急性发作表现。BALF（支气管肺泡灌洗液）中白细胞总数及嗜酸性粒细胞分类明显增多。血清及BALF中IL-4明显增高,INF-γ降低,OVA特异性IgE增高。肺组织病理切片见细支气管及伴行血管周围有较多炎症细胞浸润,嗜酸性粒细胞聚集,杯状细胞增生,粘液分泌增加,平滑肌增生肥厚,部分肺泡间隔断裂形成肺气肿。1结论:通过对方法的...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：124 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
肺组织病理切片H.E染色（×100）
Control Asthma图 1-3 BALF 细胞涂片瑞氏染色（×400）Fig. 1-3 Morphologic assessment of cells in BALF by Wright's stain（×400）注：箭头所指为嗜酸性粒细胞*81624324048BCW×（05/ml）1
含 mIL-4RA的重组pMD18-T simple质粒进行核苷酸序列测定，结果显示pMD18-Tsimple 质粒中插入的 mIL-4RA 基因序列与预期序列完全一致（图 2-3）。1 2 3500bp400bp300bp图 2-2 含重组 pMD18-T simple 质粒阳性菌落 PCR 结果Fig.2-2 PCR product of recombinant pMD18-T simple positive colonies1 and2：PCR product of positive colonies，3：DNA Marker
【参考文献】：
期刊论文
[1]过敏性哮喘大鼠模型的制备[J]. 崔龙苹,杨永清,陈汉平,马淑兰,张英英. 上海实验动物科学. 2000(02)
[2]绿色荧光蛋白及其应用[J]. 张峰,任燕,陆长德. 生命科学. 1999(02)
本文编号：3587627
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：124 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
肺组织病理切片H.E染色（×100）
Control Asthma图 1-3 BALF 细胞涂片瑞氏染色（×400）Fig. 1-3 Morphologic assessment of cells in BALF by Wright's stain（×400）注：箭头所指为嗜酸性粒细胞*81624324048BCW×（05/ml）1
含 mIL-4RA的重组pMD18-T simple质粒进行核苷酸序列测定，结果显示pMD18-Tsimple 质粒中插入的 mIL-4RA 基因序列与预期序列完全一致（图 2-3）。1 2 3500bp400bp300bp图 2-2 含重组 pMD18-T simple 质粒阳性菌落 PCR 结果Fig.2-2 PCR product of recombinant pMD18-T simple positive colonies1 and2：PCR product of positive colonies，3：DNA Marker
【参考文献】：
期刊论文
[1]过敏性哮喘大鼠模型的制备[J]. 崔龙苹,杨永清,陈汉平,马淑兰,张英英. 上海实验动物科学. 2000(02)
[2]绿色荧光蛋白及其应用[J]. 张峰,任燕,陆长德. 生命科学. 1999(02)
本文编号：3587627
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