百草枯中毒大鼠肺纤维化中DERLIN-1与GRP78的表达

发布时间：2017-05-12 09:10

  本文关键词：百草枯中毒大鼠肺纤维化中DERLIN-1与GRP78的表达，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:观察内质网相关降解蛋白1(Derlin-1)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在百草枯(PQ)中毒大鼠肺纤维化中的表达变化,探讨Derlin-1和GRP78在百草枯中毒大鼠的肺纤维化形成过程中的作用。方法:雄性SD大鼠50只,随机分为染毒组(PQ组)40只和对照组10只,染毒组用浓度为20%的百草枯溶液以1:50的比例用生理盐水稀释后,按15mg/kg剂量一次性腹腔注射给药染毒,对照组予以等量生理盐水腹腔注射。染毒组依据染毒时间的长短随机分为1D、7D、14D、21D四个亚组,排除腹腔注射药物后不符合造模标准和死亡的大鼠,最后于1d、7d、14d和21d各处死动物6只取肺组织,而对照组则在1d全部处死取肺组织,最后随机选取6只入实验。观察大鼠染毒后的行为学表现,大鼠肺组织大体形态和计数肺系数,行苏木素一伊红(HE)染色和Masson染色观察肺组织中肺泡炎及肺纤维表象,并进行程度评分;利用免疫组化(IH)检测大鼠肺组织中GRP78、Derlin-1的表达变化,酶联免疫吸附法(Elisa)检测肺组织匀浆中Derlin-1的表达。结果:1、一般情况变化:对照组大鼠精神可、呼吸平稳、活动自如。染毒组大鼠于染毒后,出现不同程度的精神萎靡、呼吸急促、鼠尾发绀、蜷缩少动、进食少等,甚至出现死亡。且上述症状于1-7天时明显加重,死亡率高;在7-21天时,大鼠精神、进食较前缓解,但仍有呼吸困难。2、肺组织大体形态:对照组大鼠肺组织呈粉红色,色泽均匀,质地柔软。染毒组出现程度不同的充血、水肿、局灶性肺实变。肺充血水肿于早期时明显,后期主要以实变、质地变硬、纤维化为主。计数各组肺系数,1D、7D、14D组肺系数均高于对照组(P0.05),7D组最高,而14D和21D组肺系数与7D比较有所降低(P0.05),差异具有统计学意义;而21D组肺系数与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。3、HE染色病理表现,肺泡炎程度评分:正常对照组大鼠肺泡结构完整、清晰。染毒组出现充血、水肿、炎性细胞浸润,后期出现成纤维细胞增生、胶原沉积。染毒各亚组肺泡炎评分均高于对照组(P0.05)。7D组最高,1D组次之,而21D肺泡炎已缓解明显。4、Masson染色结果及肺纤维化程度评分:对照组大鼠肺组织结构正常。染毒组随时间延长可见逐渐增多的蓝染的胶原纤维沉着,部分实变、纤维化。染毒各组肺纤维评分均高于对照组,7D、14D、21D组与对照组相比较(P0.05),具有统计学意义。而1D组与对照组相比(P0.05),无统计学意义。且随染毒时间延长,染毒组各组肺纤维评分越来越高。5、肺组织中Derlin-1蛋白表达:免疫组化结果显示,Derlin-1主要表达于支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞和血管内皮细胞的胞浆中。Elisa法和免疫组化结果均提示Derlin-1在正常对照组中表达最低,在染毒组的表达呈先上升后下降的趋势,于14D组表达最高,21D组有所下降但仍高于1D和7D。染毒各组与正常组的差异(P0.05),具有统计学意义。6、肺组织中GRP78蛋白表达:结果显示,GRP78蛋白主要在支气管上皮细胞、肺泡细胞及血管内皮细胞胞浆中表达。且在1D组表达开始升高,在7D组达到最高,14D组开始有所下降但仍高于1D组,而21D组较14D下降明显(P0.05),但染毒组表达水平均较对照组高(P0.05),差异均具有统计学意义。结论:1、百草枯中毒可成功构建大鼠肺纤维化模型。2、百草枯中毒大鼠体内出现了内质网应激反应。3、随着百草枯中毒时间的延长,肺组织中内质网相关蛋白Derlin-1、GRP78表达呈规律性改变。4、Derlin-1与GRP78可能在肺间质纤维化的发生发展过程中起着重要作用。
【关键词】：百草枯 内质网应激 Derlin-1 GRP78 肺间质纤维化
【学位授予单位】：四川医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R563;R595.4
【目录】：

• 中文摘要3-6
• Abstract6-10
• 前言10-14
• 材料与方法14-22
• 结果22-32
• 讨论32-39
• 结论39-40
• 参考文献40-46
• 英汉缩略词对照表46-48
• 致谢48-49
• DERLIN-1 与肺部疾病的关系(综述)49-60
• 参考文献56-60

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 戴木森;钱欣;;百草枯致肺纤维化的机制及其治疗进展[J];创伤与急诊电子杂志;2013年01期

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本文编号：359345