pRNA纳米基因载体构建及其对哮喘STAT5b基因的沉默作用研究

发布时间：2022-01-23 09:20

　　目的构建出携带小干扰RNA（siRNA）和RNA适配体（aptamer）的包装RNA （packaging RNA, pRNA）纳米基因载体,研究其对哮喘小鼠脾淋巴细胞STAT5b基因的沉默作用。方法使用PCR和体外转录的方法构建靶向沉默STAT5b基因的pRNA/siRNA单体、靶向结合CD4分子的pRNA/aptamer（8）单体及pRNA/aptamer（14）单体,进而构建出pRNA/siRNA-pRNA/aptamer（8）二聚体和pRNA/siRNA-pRNA/aptamer（14）二聚体。用卵清蛋白（OVA）致敏、激发的方法建立哮喘小鼠模型,用淋巴细胞分离液分离出脾淋巴细胞,再用已构建的pRNA单体、pRNA二聚体进行淋巴细胞体外干预,RT-PCR法检测在有／无转染试剂条件下pRNA单体和pRNA二聚体的干预效果,CCK—8法检测pRNA/siRNA单体和pRNA/aptamer（8）单体的毒性作用。结果（1）临床表现、肺组织病理检查和肺泡灌洗液白细胞总数计数结果显示,哮喘小鼠模型制备成功。（2）测序及二级结构预测结果显示,pRNA/siRNA、pRNA/aptamer（... 

【文章来源】：暨南大学广东省 211工程院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

ThZ淋巴细胞在哮喘中的作用[l4]

大学学位论文聚体。在pRNA的双链螺旋区上添加siRNA、RNAaptamer、RNA酶或化学基团等功建出带有相应功能的pRN刀siRNA、pRN刀aptamer、pRN刀核酶和pRNA/叶再通过左右环碱基互补的相互作用形成pRNA多聚体〔2’]。理论上，pRNA能能分子的pRNA六聚体，同时携带治疗分子、靶向分子、示踪分子等多个功安全高效、靶向性强的基因治疗，故pRNA是非常有前景的纳米基因载体。

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【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3604057