油酸对肺损伤体外模型SP-B表达的初步研究

发布时间：2017-05-18 16:15

  本文关键词：油酸对肺损伤体外模型SP-B表达的初步研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：检测油酸刺激后A549细胞上清液TNF-ɑ浓度，了解细胞损伤机制；观察不同浓度油酸刺激下A549细胞中SP-B的表达与分布变化，探讨油酸与肺损伤的关系，建立油酸致肺损伤体外实验模型，为临床预防和治疗肺损伤提供新的思路和实验方法。 方法：1.将A549细胞分为对照组和实验组，实验组分别用不同终浓度的油酸处理24h。 2.CCK-8法检测油酸对A549细胞增殖的影响，倒置电子显微镜观察细胞形态学变化。 3.免疫细胞化学法检测SP-B在各组中的表达和变化。 4.采用ELISA法检测油酸刺激下A549细胞上清液中TNF-ɑ浓度变化。 结果：1.CCK-8法检测浓度越高的油酸干预A549细胞24小时后能直接抑制A549细胞增殖，A549细胞各实验组在油酸刺激24小时后与对照组相比均有统计学意义（P＜0.05）。 2.细胞形态学表现：对照组中A549细胞为多角形、细胞质丰富，突起明显，贴壁状况良好，细胞间融合成铺路石状。油酸处理组（浓度：300μmol/L）A549细胞肿大变圆，细胞内出现少量大小不等颗粒；油酸处理组（浓度：400μmol/L）A549细胞胞体变圆明显，体积缩小，胞质内出现大量大小不等的颗粒；油酸处理组（浓度：500μmol/L）A549细胞器崩解，碎裂。 3.ELISA法实验检测显示各实验组中细胞上清液TNF-α浓度与对照组变化不大，差异无统计学意义。 4.免疫细胞化学染色结果：油酸处理组（浓度：300μmol/L）和油酸处理组（浓度：400μmol/L）表达分别为0.1379±0.01934；0.0873±0.02144，与对照组SP-B的表达（0.2647±0.06317）表达减弱，差异有统计学意义。 结论：1．成功建立油酸致肺损伤体外实验模型。 2．油酸引起A549细胞形态学变化同时，也引起了SP-B表达下调。 3．油酸致伤肺泡Ⅱ型上皮细胞机制可能不是通过炎症介质或炎症反应信号通路影响肺泡表面活性物质B表达。
【关键词】：急性肺损伤 油酸 肺表面活性物质B
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R563
【目录】：

• 中英文缩略词4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-11
• 材料与方法11-15
• 结果15-19
• 讨论19-22
• 结论22-23
• 参考文献23-26
• 综述：急性肺损伤实验动物模型26-36
• 参考文献34-36
• 致谢36-38
• 作者简介38

【参考文献】

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1 陈静,赵金垣,王广增;血红素氧合酶-1激活对大鼠化学性急性呼吸窘迫综合征的防治作用及其机制[J];中华劳动卫生职业病杂志;2005年03期

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本文编号：376514