高氧致慢性肺疾病新生鼠Caveolin-1表达及其可能机制的研究
发布时间:2023-11-03 19:36
前言:随着机械通气的广泛开展、早产儿管理技术的日益提高和肺表面活性物质的普遍应用,随之而来因长时间吸入高浓度氧所导致的早产儿支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)却成为威胁早产儿健康和生命的首要疾病。因其发病机制尚不十分清楚,目前仍无有效的防治手段,反复下呼吸道感染、高反应性气道疾病、生长发育迟缓、喂养困难等一直是存活者常遗留的病症,因此,早产儿呼吸系统疾病一直是国内外新生儿科医生面临的最具挑战性的存在。尽管BPD的发病机制目前尚未完全清楚,但其肺间质纤维化的晚期病理结局已无可置疑,肺间质纤维化主要表现为过度增殖的肺成纤维细胞(lung fibrolast,LF)沉积于肺间质或替代正常的肺上皮。在医学方面对BPD的研究始终持续着也是由于在其治疗中,肺间质纤维化的防治一直是一个难题,所以。目前关于BPD肺间质纤维化发生机制的研究多集中以下方面:(1)细胞外基质合成与降解失衡;(2)庞大的细胞因子网络,转化生长因子β(TGF-β)是其中研究最多的,不仅对于胶原蛋白的合成同时对成纤维细胞的增生两者它都是可以产生促进作用的;(3)细胞作用的复杂化:在纤...
【文章页数】:75 页
【学位级别】:博士
【文章目录】:
摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 暴露高氧后新生鼠肺组织Caveolin-1 表达及其作用的研究
1 前言
2 实验材料与方法
2.1 材料
2.1.1 实验动物
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要仪器
2.2 方法
2.2.1 实验对象、分组及BPD大鼠动物模型的建立
2.2.2 标本的采集和处理
2.2.3 免疫组化技术检测各组肺组织caveolin-1 表达
2.2.4 Western blot法检测各组肺组织caveolin-1 动态表达
2.2.5 Real-time PCR法检测各组肺组织caveolin-1 m RNA的动态表达
2.3 统计学分析
3 结果
3.1 肺组织的形态学改变
3.2 肺组织纤维化评分
3.3 caveolin-1 在空气组和高氧组不同日龄大鼠肺组织的动态表达
3.3.1 免疫组织化学染色方法观察caveolin-1 在各组不同日龄大鼠肺组织的动态表达
4 讨论
5 结论
第二部分 暴露高氧后新生鼠肺成纤维细胞Caveolin-1 表达及其对细胞周期的影响
1 前言
2 实验材料与方法
2.1 材料
2.1.1 实验动物同论文一
2.1.2 实验试剂
2.1.3 实验仪器
2.2 方法
2.2.1 实验对象、分组及BPD模型的建立同论文一
2.2.2 体外肺成纤维细胞的分离、培养及鉴定
2.2.3 Western blot法检测各组肺成纤维细胞caveolin-1 动态表达
2.2.4 流式细胞技术检测各组肺成纤维细胞的周期
2.3 统计学分析
3 结果
3.1 原代培养大鼠肺成纤维细胞形态及鉴定结果
3.2 Western blot方法检测caveolin-1 在肺成纤维细胞动态表达
3.3 空气和高氧各组LF细胞周期的变化
4 讨论
5 结论
第三部分 干预TGF-β/SMAD信号转导通路后caveolin-1 的动态表达
1 前言
2 材料和方法
2.1 材料
2.1.1 实验动物
2.1.2 实验试剂
2.1.3 实验仪器
2.2 方法
2.2.1 研究对象
2.2.2 细胞分组
2.2.3 Western blot法检测各组成纤维细胞Caveolin-1 的表达
2.2.4 Real-time PCR法检测各组成纤维细胞的Caveolin-1 m RNA水平同论文一。
2.2.5 流式细胞技术检测各组肺成纤维细胞的周期
2.3 统计学分析
3 结果
3.1 Western blot法检测Caveolin-1 在各组成纤维细胞中的表达
3.2 Real-time PCR法检测各组成纤维细胞的Caveolin-1 m RNA水平
3.3 流式细胞技术检测各组肺成纤维细胞的周期
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历
本文编号:3859769
【文章页数】:75 页
【学位级别】:博士
【文章目录】:
摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 暴露高氧后新生鼠肺组织Caveolin-1 表达及其作用的研究
1 前言
2 实验材料与方法
2.1 材料
2.1.1 实验动物
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要仪器
2.2 方法
2.2.1 实验对象、分组及BPD大鼠动物模型的建立
2.2.2 标本的采集和处理
2.2.3 免疫组化技术检测各组肺组织caveolin-1 表达
2.2.4 Western blot法检测各组肺组织caveolin-1 动态表达
2.2.5 Real-time PCR法检测各组肺组织caveolin-1 m RNA的动态表达
2.3 统计学分析
3 结果
3.1 肺组织的形态学改变
3.2 肺组织纤维化评分
3.3 caveolin-1 在空气组和高氧组不同日龄大鼠肺组织的动态表达
3.3.1 免疫组织化学染色方法观察caveolin-1 在各组不同日龄大鼠肺组织的动态表达
4 讨论
5 结论
第二部分 暴露高氧后新生鼠肺成纤维细胞Caveolin-1 表达及其对细胞周期的影响
1 前言
2 实验材料与方法
2.1 材料
2.1.1 实验动物同论文一
2.1.2 实验试剂
2.1.3 实验仪器
2.2 方法
2.2.1 实验对象、分组及BPD模型的建立同论文一
2.2.2 体外肺成纤维细胞的分离、培养及鉴定
2.2.3 Western blot法检测各组肺成纤维细胞caveolin-1 动态表达
2.2.4 流式细胞技术检测各组肺成纤维细胞的周期
2.3 统计学分析
3 结果
3.1 原代培养大鼠肺成纤维细胞形态及鉴定结果
3.2 Western blot方法检测caveolin-1 在肺成纤维细胞动态表达
3.3 空气和高氧各组LF细胞周期的变化
4 讨论
5 结论
第三部分 干预TGF-β/SMAD信号转导通路后caveolin-1 的动态表达
1 前言
2 材料和方法
2.1 材料
2.1.1 实验动物
2.1.2 实验试剂
2.1.3 实验仪器
2.2 方法
2.2.1 研究对象
2.2.2 细胞分组
2.2.3 Western blot法检测各组成纤维细胞Caveolin-1 的表达
2.2.4 Real-time PCR法检测各组成纤维细胞的Caveolin-1 m RNA水平同论文一。
2.2.5 流式细胞技术检测各组肺成纤维细胞的周期
2.3 统计学分析
3 结果
3.1 Western blot法检测Caveolin-1 在各组成纤维细胞中的表达
3.2 Real-time PCR法检测各组成纤维细胞的Caveolin-1 m RNA水平
3.3 流式细胞技术检测各组肺成纤维细胞的周期
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历
本文编号:3859769
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