硒代蛋氨酸对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液中细胞因子水平的影响

发布时间：2017-05-24 00:09

  本文关键词：硒代蛋氨酸对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液中细胞因子水平的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的哮喘是一种由多种细胞及细胞组分参与的慢性气道炎症反应性疾病,免疫调节在哮喘发病过程中有重要作用,硒代蛋氨酸在免疫调节中的作用越来越受到重视,本实验通过硒代蛋氨酸对哮喘大鼠模型进行干预,比较各组大鼠肺泡灌洗液中白介素4(interleukin-4,IL-4)和干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)含量、细胞计数及分类,肺组织中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达,探讨硒代蛋氨酸在哮喘大鼠的抗炎作用及其可能机制。方法按随机分组的原则,将50只SPF级雄性大鼠随机分为5组,每组10只:分别为模型组、对照组、地塞米松组、硒代蛋氨酸低剂量组和高剂量组;(1)模型组:在第1、8、15天分别给大鼠1ml致敏液(含卵清蛋白1mg、氢氧化铝100mg)腹腔注射致敏。从第16天开始将已致敏大鼠放在自制雾化箱内,每天30分钟,连续7天予1%卵清蛋白雾化激发,如大鼠表现为挠鼻、咳嗽、腹肌痉挛、反应迟钝、二便失禁等,表明造模成功。(2)对照组:致敏和激发均用生理盐水代替。(3)地塞米松组:在每日激发前30分钟给大鼠腹腔注射1mg/kg地塞米松。(4)硒代蛋氨酸低、高剂量组:在每日激发前30分钟给分别给大鼠腹腔注射0.1mg/kg、2.5 mg/kg的硒代蛋氨酸。在最后一次激发后的24小时内将大鼠处死,收集肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,分别分离细胞沉淀、上清,并制成标本切片。运用ELISA方法对BALF上清液IL-4、IFN-γ水平进行测定。运用改良牛氏计数台对BALF沉淀细胞进行计数并将沉淀细胞涂片染色后进行分类计数。运用免疫组化方法对大鼠肺组织中细胞间粘附分子1(ICAM-1)的表达进行测定。运用统计学方法对各组数据进行分析。结果1.与哮喘组比较,地塞米松组及硒代蛋氨酸低、高剂量组大鼠BALF中IL-4含量均明显降低(P0.05);与正常对照组比较,余各组大鼠BALF中IL-4含量均明显升高(P0.05);硒代蛋氨酸低、高剂量组比较,两者间差异无统计学意义。2.与哮喘组比较,地塞米松组及硒代蛋氨酸低、高剂量组大鼠BALF中IFN-γ含量明显升高(P0.05);与正常对照组比较,余各组大鼠BALF中IFN-γ含量均明显升高(P0.05);硒代蛋氨酸低、高剂量组比较,两者间差异无统计学意义。3.与哮喘组比较,地塞米松组及硒代蛋氨酸低、高剂量组大鼠BALF中细胞计数均明显下降(P0.05);与正常对照组比较,余各组大鼠BALF中细胞计数均明显升高(P0.05);硒代蛋氨酸低、高剂量组比较,两者间差异无统计学意义。4.与哮喘组比较,地塞米松组及硒代蛋氨酸低、高剂量组大鼠肺组织ICAM-1表达明显降低,差异有统计学意义(P0.05);与正常对照组比较,余各组大鼠肺组织ICAM-1表达明显升高(P0.05);硒代蛋氨酸低、高剂量组比较,两者间差异无统计学意义。结论硒代蛋氨酸和地塞米松均能使哮喘大鼠BALF中IL-4的含量降低、IFN-γ的含量增加,肺组织中ICAM-1的表达降低,减少气道炎症细胞浸润,减轻哮喘气道炎症反应。
【关键词】：硒代蛋氨酸 哮喘 IL-4 IFN-γ ICAM-1 大鼠
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R562.25
【目录】：

• 英文缩写一览表6-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 1 前言12-13
• 2 实验材料13-15
• 2.1 实验动物13
• 2.2 药物和试剂制备13-14
• 2.3 主要设备和仪器14-15
• 3 实验方法15-21
• 3.1 实验分组15
• 3.2 SD大鼠哮喘模型建立15-16
• 3.3 标本的留取与保存16
• 3.4 采用 ELISA 方法测 BALF 上清中 IL-4 含量16-17
• 3.5 采用 ELISA 方法测 BALF 上清中 IFN-γ 含量17-18
• 3.6 大鼠BALF细胞沉淀的计数与分类18-19
• 3.7 制作肺组织石蜡切片19-20
• 3.8 肺组织中 ICAM-1 的测定20-21
• 3.9 统计分析方法21
• 4 结果21-27
• 4.1 大鼠BALF上清中IL-4 含量比较21-22
• 4.2 大鼠BALF上清中IFN-γ 含量的比较22-23
• 4.3 大鼠BALF细胞沉淀分类与计数23-24
• 4.4 大鼠肺组织中ICAM-1 的表达24-27
• 5 讨论27-31
• 6 结论31-32
• 参考文献32-37
• 附录37-38
• 致谢38-39
• 综述39-48
• 参考文献45-48

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本文编号：389402