骨髓间充质干细胞对内毒素致大鼠急性肺损伤生物学作用的实验研究
发布时间:2024-03-13 04:20
目的: 严重感染脓毒血症仍然是导致急性肺损伤最重要和常见的原因,目前尚缺乏十分有效的治疗手段。本研究旨在观察骨髓间充质干细胞(MSC)在脂多糖(LPS)诱发的大鼠急性肺损伤肺组织中的植入和分布,以及MSC对LPS致大鼠急性肺损伤的生物学作用和可能的机制,为干细胞治疗急性肺损伤提供实验线索。 方法和结果: 1.大鼠骨髓MSC的分离培养和鉴定 采用密度梯度离心和全骨髓贴壁分离法均能成功分离纯化雄性大鼠骨髓MSC,P4代细胞呈均一的长条形、梭形等成纤维细胞样特征性形态,流式细胞仪检测细胞表面标志呈CD34-/CD45-/CD90+,并具有成骨、成脂肪分化潜能。 2.雄性MSC在雌性大鼠肺组织中的植入 制备雄性大鼠性别决定基因(Sry)探针,应用荧光原位杂交(FISH)技术观察静脉注入雄性MSC后,雄性MSC在雌性大鼠肺组织中的植入。结果显示给予LPS和生理盐水(NS)组没有检测到呈sry基因阳性的细胞,给予NS和MSC组仅在6h和1d发现阳性细胞,给予LPS和MSC组直到3w仍有阳性细胞,阳性细胞存在于肺...
【文章页数】:112 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
本文编号:3927179
【文章页数】:112 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
图1.2APO代细胞形态(荧光显微镜x100)
外周细胞逐渐稀疏,呈放射状分布,细胞集落大小不等。10一14d后,细胞密度进一步增加,基本铺满培养瓶底。总之,原代细胞以贴壁生长的梭形细胞为主,呈集落分布,体积较小,细胞浆丰富,核浆比例正常。图1.2A。图1.2APO代细胞形态(荧光显微镜x100)P。代细胞呈小圆形、梭形或....
图1.ZBP4代细胞形态(倒置显微镜下x100)
军医进修学院博士学位论文的细胞增殖速度相似,PZ细胞约5~7d基本铺满培养瓶梭形等成纤维细胞样间充质干细胞的特征性形态。图1达到较高的均一性。
图1.3细胞生长曲线
细胞在第3一5天生长较快,至第7天进入平台期2细胞生长曲线大鼠MSC的生长曲线见图1.3。培养第1天,细胞数量有所减少,第2~3天增长缓慢,然后细胞进入对数生长期,至第7天进入平台期,细胞数量
图1.4MSC表面分子流式分析结果
军医进修学院博士学位论文增加。两种分离方法获得的MSC生长曲线一致。面分子的表达细胞术检测结果显示,利用PerC。11分离液密度梯度离心和筛选法培养的P;代MSe均表达eDgo(99.51%、99.23%),不表、0.21%)和CD34(0.27%、0.19%),即CD34一/C....
本文编号:3927179
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