基于大肠腑实证肠粘膜屏障损伤与肺ALI/ARDS发生相关性研究

发布时间：2025-01-09 04:17

　　目的建立“大肠腑实证”由肠及肺动物模型并探索大鼠肠淋巴液引流的操作技术；分别观察模型组大鼠与假手术组大鼠肠淋巴液成分的差别；探讨肠-淋巴途径在大肠腑实证大鼠急性肺损伤(acute lung injury, ALI)中的作用及其可能的分子机制Toll样受体4(toll like receptor-4, TLR-4)信号通路。 方法建立并熟练掌握大鼠肠淋巴液引流的方法。选用Wistar大鼠20只,随机分为模型组和假手术组；取大鼠肺组织与末端回肠组织,行病理学观察,并于电镜下观察肺组织Ⅱ型肺泡上皮细胞及肠组织上皮细胞紧密连接结构。采用原位末端转移酶标记技术(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling, TUNEL)检测肺组织与末端回肠组织细胞凋亡程度。同时分别引流各组大鼠的肠系膜淋巴液,进行白细胞计数及分类；检测淋巴液中内毒素水平,碱性磷酸酶(alkline phosphatase, AKP)、乳酸脱氢酶(1actate dehydrogenase, LDH)、肌酸激酶(creatine kinase, CK)、谷氨酰胺转移酶(Glutathione S Tra...

【文章页数】：114 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
目录
符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、大肠腑实证”由肠及肺动物模型的建立
    1.1 对象和方法
        1.1.1 实验动物
        1.1.2 实验材料
        1.1.3 方法
    1.2 结果
        1.2.1 一般情况观察
        1.2.2 基础指标检测
        1.2.3 大鼠肺、回肠组织的形态学观察
        1.2.4 肠粘膜上皮细胞与肺组织细胞凋亡
    1.3 讨论
    1.4 小结
二、大鼠肠系膜淋巴管引流技术及肠系膜淋巴液成分分析
    2.1 对象和方法
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验材料
        2.1.3 实验方法
    2.2 结果
        2.2.1 肠系膜淋巴管淋巴液引流的成功率
        2.2.2 淋巴液细胞成分及白细胞比例检测
        2.2.3 淋巴液中内毒素水平
        2.2.4 淋巴液中酶类指标
        2.2.5 淋巴液中蛋白含量及细胞因子水平变化
    2.3 讨论
    2.4 小结
三、肠淋巴途径在大肠腑实证早期所致肺损伤中的作用
    (一) 肠系膜淋巴管引流对大肠腑实证大鼠肺损伤的影响
        3.1 对象和方法
            3.1.1 实验动物
            3.1.2 模型制备和分组
            3.1.3 血、肺泡灌洗液(BALF)及组织取材
            3.1.4 回肠末端MPO与DAO活性测定
            3.1.5 肺血管通透性检测
            3.1.6 肺组织MPO活性
            3.1.7 BALF中白细胞比例
            3.1.8 血浆中及肺泡灌洗液中内毒素检测
            3.1.9 蛋白含量及细胞因子检测
            3.1.10 肺组织与回肠组织HE染色
            3.1.11 统计学方法
        3.2 结果
            3.2.1 肠淋巴管引流对大鼠末端回肠组织DAO及MPO活性的影响
            3.2.2 肺血管通透性变化及肺组织MPO活性改变
            3.2.3 BALF中白细胞比例变化
            3.2.4 血浆及肺泡灌洗液中内毒素水平
            3.2.5 蛋白含量及细胞因子浓度
            3.2.6 病理学改变
        3.3 讨论
        3.4 小结
    (二) 静脉回输大肠腑实证大鼠肠淋巴液引起肺损伤
        3.5 对象和方法
            3.5.1 实验材料
            3.5.2 实验方法
            3.5.3 统计学处理
        3.6 结果
            3.6.1 肺组织W/D的测定
            3.6.2 髓过氧化物酶(MPO)测定
            3.6.3 肺组织匀浆中TNF-a及IL-6水平
            3.6.4 肺组织病理学变化
        3.7 讨论
        3.8 小结
四、TLR-4信号通路在大肠腑实证大鼠肠淋巴途径中的作用机制研究
    4.1 对象和方法
        4.1.1 实验动物及分组
        4.1.2 主要仪器
        4.1.3 试剂及药品
        4.1.4 实验动物模型制备
        4.1.5 Western-blot方法检测TLR-4、IRAK-4、NF-κB蛋白表达
        4.1.6 数据处理及统计学分析
    4.2 结果
        4.2.1 肠组织TLR-4、NF-κB、IRAK-4蛋白的表达动态变化
        4.2.2 肺组织TLR-4、NF-κB、IRAK-4蛋白的表达动态变化
        4.2.3 模型组肺组织与回肠组织TLR-4蛋白表达水平与淋巴液中内毒素水平变化相关性分析
        4.2.4 模型组肺组织与回肠组织TLR-4蛋白表达水平与淋巴液中内毒素水平变化相关性分析
    4.3 讨论
    4.4 小结
全文结论
论文创新点
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述
    综述一 肠淋巴系统：导致器官损伤的因素
        参考文献
    综述二 重症腹部外科感染与肺损伤
        参考文献
致谢



本文编号：4025135