IL-17F/IL-17RC对大鼠肺微血管内皮细胞小窝蛋白1表达的影响

发布时间：2025-01-15 10:53

　　目的探讨白细胞介素(IL)-17F及IL-17受体C(IL-17RC)对大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)表达的小窝蛋白1(Cav-1)影响。方法将体外培养的大鼠PMVECs分为时效组以及IL-17RC信号通路干预组;根据时效组结果:即IL-17F诱导大鼠PMVECs的Cav-1及其磷酸化表达峰值的时间,制定IL-17RC信号通路干预组IL-17F与大鼠PMVECs孵育时间:(1)时效组:100ng/ml的IL-17F刺激0 h、0.5 h、1.5 h、3 h、6 h、12 h、24 h后Western印迹法检测Cav-1表达以及0 min、10 min、30 min、60 min、90 min、120 min后检测Cav-1及其磷酸化(p-Cav-1)表达;(2)IL-17RC信号通路干预组:si RNA病毒与大鼠PMVECs预孵育3 d后分成2组,第1组给予100 ng/ml的IL-17F刺激60 min后检测p-Cav-1表达,第2组给予100 ng/ml的IL-17F刺激24 h后检测Cav-1表达,各组分别设对照组、non-si RNA组、IL-17RC-si RNA组、IL...

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英文摘要
1 前言
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验器材
        2.1.3 化学试剂
        2.1.4 试剂配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 大鼠PMVECs分离培养与鉴定
        2.2.2 IL-17RC-siRNA滴度复核以及MOI测定、转染与鉴定
        2.2.3 IL-17RC-siRNA转染与鉴定
        2.2.4 细胞总蛋白提取
        2.2.5 总蛋白定量
        2.2.6 Western-blot检测
        2.2.7 转膜
        2.2.8 封闭
        2.2.9 一抗孵育
        2.2.10 二抗孵育
        2.2.11 化学发光，显影，定影
        2.2.12 图象分析
        2.2.13 Cav-1，p-Cav-1，IL-17RC Western-blot过程示意图
        2.2.14 实验分组和处理
        2.2.15 统计学处理
3. 结果
    3.1 IL-17F对大鼠PMVECs中Cav-1 表达的影响
    3.2 IL-17F对大鼠PMVECs中Cav-1 及p-Cav-1 表达的影响
    3.3 IL-17RC-siRNA病毒转染大鼠PMVECs的结果
    3.4 IL-17RC在IL-17F诱导PMVECs中Cav-1 及p-Cav-1 表达变化中的作用
4. 讨论
5.参考文献
个人简历
致谢
综述
    参考文献



本文编号：4027294