氧合血常温体外持续灌注对供肺保存效果的动物实验研究

发布时间：2017-07-18 08:15

  本文关键词：氧合血常温体外持续灌注对供肺保存效果的动物实验研究

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【摘要】：目的 研究不使用呼吸机、氧合血常温经肺动脉持续灌注对离体猪肺的保护作用,并探讨肺缺血再灌注损伤与细胞凋亡的相关性。为临床较长时间保存供肺并可长途运输提供实验依据。方法采用健康纯种的广西巴马小香猪24只,随机分为两组,分别制备双肺离体温血灌注模型和冷缺血模型,即：实验组(不使用呼吸机、氧合血常温经肺动脉持续灌注8h保存供肺,n=12)和对照组(Celsior液经肺动脉灌注后于4℃深低温保存供肺8h,n=12。供肺保存8h后行左肺移植手术,术后机械通气24h。检测肺含水量、左下肺静脉血氧分压(LIPV-PCO2)、肺通气阻力(LR)等指标评估肺功能；HE染色光镜下观察行肺组织水肿分‘级并计数肺泡细胞死亡率,评估肺组织损伤程度。通过TUNEL法结合透射电镜观察来阐述肺泡细胞凋亡水平、凋亡的肺泡细胞类型及凋亡趋势；结果1.肺功能检测：术后各时间点比较,实验组肺含水量、LR显著低于对照组,LIPV-PCO2显著高于对照组(P0.05),实验组肺功能显著优于对照组；实验组术后24h肺含水量、LR反而显著低于术后12h,LIPV-PCO2显著高于术后12h(P0.05);2.HE染色观察：实验组各时间点肺组织损伤较对照组轻；对照组肺组织损伤术后24h最为严重,70%-80%肺泡腔出现不同程度水肿或出血,甚至大片间质出血、坏死。实验组于术后12h最为严重,20-30%肺泡腔出现水肿液,局部肺泡腔及肺间质出血,且于12h后有好转趋势。肺泡细胞死亡率：实验组各时间点显著低于对照组(P0.05)；对照组肺泡细胞死亡率逐渐增加,术后24h达32.7±4.6%；实验组术后肺泡细胞死亡率于术后12h达最高15.8±2.1%。3. Tunel检测：实验组肺泡细胞凋亡率各时间点显著低于对照组(P0.05),实验组术后6h达最高为8.2±1.5%,术后24h肺泡细胞凋亡率显著低于术后6h(P0.05)；术后24h内肺泡细胞凋亡率与肺含水量、LR呈正显著相关(r分别为0.890、0.918,P0.05),与LIPV-PCO2呈负显著相关(r为-0.784,P0.05)；4.透射电镜观察：凋亡肺泡细胞以AECⅡ为主,约占80%。实验组各时间肺泡细胞凋亡水平低于对照组,且凋亡上升趋势更早得到控制。结论：1.氧合血常温经肺动脉持续灌注供肺保存方式能有效减轻LIRI,使猪肺移植术后肺功能得到改善,其供肺保存效果明显优于“低温静态保存”方式。2.肺移植术后早期(24h内),肺泡细胞凋亡率与LIRI有着显著的相关性,凋亡水平越高,LIRI损伤程度越严重。且凋亡主要肺泡细胞类型为AECⅡ。3.温血灌注保存方式可能通过降低肺泡细胞凋亡水平,减少LIRI,起到供肺的保护作用。
【关键词】：肺移植 供肺保护 氧合血 体外灌注 肺损伤 细胞凋亡
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R563
【目录】：

• 中英文缩略词5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-14
• 研究对象和方法14-21
• 技术路线14
• 1.实验动物及主要材料14-16
• 2.实验方法16-21
• 实验结果21-35
• 1.移植后肺功能检测21-23
• 2.猪供肺组织HE染色观察23-28
• 3.Tunel染色结果28-30
• 4.透射电镜结果30-33
• 5.肺泡细胞凋亡水平和肺功能相关性分析33-35
• 讨论35-42
• 结论42-43
• 参考文献43-47
• 附图47-48
• 综述48-55
• 综述参考文献52-55
• 致谢55

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本文编号：556766