骨髓间充质干细胞在染矽尘大鼠体内示踪研究

发布时间：2017-07-25 16:28

  本文关键词：骨髓间充质干细胞在染矽尘大鼠体内示踪研究

  更多相关文章： 骨髓间充质干细胞 矽肺 绿色荧光蛋白 转染 示踪 归巢

【摘要】：目的了解骨髓间充质干细胞(BMMSC)在染矽尘大鼠体内的分布情况。方法取7只无特定病原体级健康雄性SD大鼠采用全骨髓贴壁法分离培养BMMSC,经慢病毒载体介导的增强型绿色荧光蛋白(LV-e GFP)转染后,采用台盼蓝染色和CCK-8法检测转染前后细胞的活力及增殖能力。取同批大鼠随机分为对照组和染尘组,每组4只。染尘组以1.0mL质量浓度为40 g/L的矽尘混悬液气管内注入染尘,对照组气管内注入1.0mL生理氯化钠溶液。以转染后的BMMSC经尾静脉注入2组大鼠体内,分别于移植后第1、2、3和4周取肺、肝、脾、心、肾脏和脑组织冰冻切片,荧光显微镜下观察转染LV-e GFP的BMMSC植入后在上述脏器组织的荧光分布,采用Image-pro plus 6.0图像分析软件计算组织荧光强度。结果感染复数为50时,BMMSC转染率达80.00%,绿色荧光表达强烈、持续,转染后BMMSC形态无改变;转染与未转染LV-e GFP的BMMSC的细胞存活率差异无统计学意义[(97.67±0.60)%vs(98.03±0.56)%,P0.05]。BMMSC增殖能力在LV-e GFP转染处理的主效应上无统计学意义(P0.05)。植入转染LV-e GFP的BMMSC后第1周,2组大鼠各脏器组织切片镜下均可见荧光分布,其中染尘组大鼠肺脏组织切片各视野均可见较强荧光,持续至植入后第4周,以气管、血管及其周围组织荧光明显,肺泡及肺间质荧光也分布较多。植入转染LV-e GFP的BMMSC后,染尘组大鼠肺脏组织4个观察时间点荧光强度均高于同时间点对照组(P0.01),且随观察时间的延长而减弱(P0.01);染尘组大鼠肝脏和心脏组织4个观察时间点以及肾脏组织第2、3和4周的荧光强度均低于同时间点对照组(P0.01);染尘组大鼠脾脏组织第1和2周的荧光强度均高于同时间点对照组(P0.01),第3和4周的荧光强度均低于同时间点对照组(P0.01);染尘组大鼠脑组织第1周的荧光强度高于同时间点对照组(P0.01)。染尘组大鼠肺脏组织第1和2周荧光强度均高于同组同时间点肝脏、肾脏和脑组织(P0.01),低于脾脏组织(P0.01);但第3和4周荧光强度均高于同组同时间点其余5种器官组织(P0.01)。结论 BMMSC进入染矽尘大鼠体内后可归巢并定植到受损肺部。
【作者单位】： 贵阳医学院;广东省职业病防治院广东省职业病防治重点实验室;
【关键词】： 骨髓间充质干细胞 矽肺 绿色荧光蛋白 转染 示踪 归巢
【基金】：国家科技支撑计划项目(2014BAI12B01) 国家自然科学基金(81302396) 广东省职业病防治重点实验室(2012A061400007)
【分类号】：R135.2
【正文快照】： 矽肺是我国常见的职业病之一,其所致肺损伤进展快、致残率高,严重危害人体健康,降低其劳动能力和生活质量,给社会和国家造成巨大的经济损失。临床现有的治疗方法很难完全阻断矽肺的发展进程,寻找安全、可靠的治疗措施成为矽肺研究中亟待解决的问题[1]。间充质干细胞是一类来源

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

1 王贤;曾玉兰;彭红星;杨荣时;;骨髓间充质干细胞抑制大鼠肺纤维化的作用机制[J];华中科技大学学报(医学版);2014年03期

2 金善丰;陈志耀;黄鹤光;;绿色荧光蛋白转基因小鼠骨髓间充质干细胞干预重症急性胰腺炎大鼠后在多脏器的分布[J];中国组织工程研究;2012年10期

3 张红珊;方建培;苏浩彬;杨e，

本文编号：572225