依达拉奉对急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡的影响

发布时间：2017-07-25 18:00

  本文关键词：依达拉奉对急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡的影响

  更多相关文章： 急性肺损伤 依达拉奉 凋亡 Bcl-2 Caspase3

【摘要】：目的在临床工作中,急性肺损伤患者病死率很高。研究发现细胞凋亡可以发生在急性肺损伤的任何时期。在临床治疗中,依达拉奉用于脑梗塞的临床治疗,但是其对肺部的作用机制还没有具体的报道,本文以大鼠实验动物模型为基础,从细胞凋亡的角度去探讨依达拉奉可能的作用机制。方法本课题选用Wistar大鼠,体重(200±10)g,雄性。随机分为3组,。对照组(con组):一次性静脉注射1 m L生理盐水;急性肺损组(ALI组):一次性给予5mg/kg脂多糖静脉注射。依达拉奉治疗组(Edaravone,EDA治疗组),一次性给予5mg/kg脂多糖静脉注射造模后,之后给予0.5mg/kg/天依达拉奉腹腔注射。7天后留取各组肺组织,行HE染色观察各组形态,免疫组织化学染色和Western blot检测各组肺组织Bcl-2、Bax和Caspase3的分布及表达情况。结果:1.HE染色结果显示:对照组细胞形态正常,肺泡结构清晰;ALI组肺泡壁出现塌陷且水肿严重,伴有大量炎性细胞的浸润,肺泡隔显著增厚,并有局部出血;与ALI组相比,EDA治疗组肺组织结构破坏及水肿较轻,炎性细胞浸润较少。2.免疫印迹结果显示:与Con组相比,ALI组中的抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平明显降低,同时观察到促凋亡蛋白Bax表达水平明显增加,且肺组织中Cleaved-caspase3蛋白的表达明显增高。与ALI组相比,EDA治疗组中的抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平明显增高,促凋亡蛋白Bax表达水平显著降低,肺组织中Cleaved-caspase3蛋白的表达显著降低。3.免疫组化结果显示:Con组中的抗凋亡蛋白Bcl-2在核浆中表达,促凋亡蛋白Bax在正常的肺组织中几乎没有表达,而且Caspase3在正常的肺组织中几乎没有表达。但是,在ALI组中我们发现了核浆中Bcl-2的表达水平明显降低,同时还发现了ALI组中Bax和Caspase3在核浆和细胞质中表达水平明显高于Con组。在EDA治疗组中我们发现:与ALI组相比,核浆中的Bcl-2的表达水平明显增高,核浆中的Bax明显降低,胞质中的Bax和Caspase3几乎没有表达,同时还发现EDA治疗组中的Caspase3蛋白几乎不表达,与con组没有区别。结论:依达拉奉在急性肺损伤大鼠肺组织中通过上调Bcl-2和下调Bax蛋白水平来降低细胞凋亡。同时,其可能通过减少Caspase3依赖途径的凋亡来保护肺组织。
【关键词】：急性肺损伤 依达拉奉 凋亡 Bcl-2 Caspase3
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R563
【目录】：

• 摘要4-6
• abstract6-11
• 第1章 绪论11-12
• 第2章 文献综述12-16
• 2.1 急性肺损伤的研究现状12
• 2.2 依达拉奉的研究及应用12-13
• 2.2.1 依达拉奉的理化性质12-13
• 2.2.2 依达拉奉的药物作用特点13
• 2.3 细胞凋亡信号途径13-15
• 2.3.1 外源性死亡受体通路14
• 2.3.2 内源性线粒体通路14
• 2.3.3 内质网应激与细胞凋亡14-15
• 2.4 依达拉奉与急性肺损伤引起的细胞凋亡15-16
• 第3章 实验材料16-19
• 3.1 实验动物16
• 3.2 主要药品与来源16-17
• 3.3 需配制的试剂17
• 3.4 仪器17-19
• 第4章 实验方法19-23
• 4.1 急性肺损伤大鼠动物模型制备19
• 4.2 实验步骤19-22
• 4.2.1 石蜡切片制作基本过程19
• 4.2.2 HE染色19-20
• 4.2.3 免疫组织化学法检测Bcl-2、Bax和Caspase3的蛋白表达20
• 4.2.4 Western blot检测Bcl-2、Bax和Caspase3的蛋白表达20-22
• 4.3 统计学处理22-23
• 第5章 实验结果23-28
• 5.1 急性肺损伤大鼠肺部 HE 染色23
• 5.2 大鼠肺组织中 Bcl-2 和 Bax 蛋白的表达23-26
• 5.2.1 Western Blot 检测肺组织中 Bcl-2 和 Bax 蛋白的表达23-24
• 5.2.2 免疫组化法检测急性肺损伤大鼠肺组织中Bcl-2 蛋白的表达24-25
• 5.2.3 免疫组化法检测急性肺损伤大鼠肺组织中Bax蛋白的表达25-26
• 5.3 急性肺损伤大鼠肺组织中Caspase3蛋白的表达检测26-28
• 第6章 讨论28-31
• 第7章 结论31-32
• 参考文献32-36
• 作者简介及在学期间所取得的科研成果36-37
• 致谢37

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