SD大鼠肺成纤维细胞的原代培养及分离纯化

发布时间：2017-08-02 19:21

  本文关键词：SD大鼠肺成纤维细胞的原代培养及分离纯化

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【摘要】：目的建立大鼠肺成纤维细胞的体外高效稳定的培养方法。方法取成年SD大鼠,采用差速贴壁法纯化与胰酶反复消化法传代,得到纯度更高产量更多的肺成纤维细胞。所得细胞采用免疫细胞化学方法加以鉴定,且进行生长曲线测定。结果肺成纤维细胞纯化率可达99.3%,细胞增殖快,生长良好,产量大。结论成功建立了肺成纤维细胞纯化与传代的方法,适用于细胞水平上的间质性肺病发病机制的研究。
【作者单位】： 福建师范大学福清校区生化系;中南大学药学院药理系;中南大学湘雅医院药剂科;
【关键词】： 肺成纤维细胞 原代培养 纯化
【基金】：国家青年科学基金项目(H0110)
【分类号】：R563
【正文快照】： 肺成纤维细胞不仅是重要的间质细胞,也是活跃的分泌细胞,并表现出免疫炎症细胞的特征。它可合成胶原蛋白、弹性蛋白等组织基质成分,合成基质金属蛋白酶和组织型金属蛋白酶抑制物,通过调节细胞外基质代谢,参与组织重建。体外成功培养肺成纤维细胞是研究肺部疾病如支气管哮喘、

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 祝华平,常立文,李文斌,刘汉楚,张谦慎;胎鼠肺细胞的分离纯化及原代培养[J];华中科技大学学报(医学版);2003年06期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 丁小芳;钟礼立;张兵;李嘉;;利多卡因对高氧暴露早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的保护作用[J];中国当代儿科杂志;2011年04期

2 王金勇;申元英;季伶斌;;胚胎大鼠肺成纤维细胞的体外培养[J];大理学院学报;2009年12期

3 黄波;付红敏;杨鸣;方芳;匡凤梧;许峰;;高氧对早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的影响及神经肽P物质的保护作用[J];第三军医大学学报;2008年24期

4 张明凤;张彦定;王昕;王虹;张龙斌;;小鼠胎肺Ⅲ型上皮细胞的分离纯化及原代培养[J];福建师范大学学报(自然科学版);2009年06期

5 黄锦桃;刘爱军;侯春莲;朱永红;李海标;;胎鼠肺成纤维细胞的改良培养法[J];解剖学研究;2005年04期

6 王少华;许峰;党红星;;不同氧浓度暴露对早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的损伤及CGRP的保护效应[J];中南医学科学杂志;2012年02期

7 李文斌,常立文,祝华平,刘汉楚,张谦慎,容志惠,王利玲,陈红兵;维甲酸下调高氧暴露下胎鼠肺成纤维细胞及Ⅱ型肺泡上皮细胞MMP-2表达[J];基础医学与临床;2005年02期

8 容志惠;陈燕;单瑞燕;刘伟;常立文;;高氧对胎鼠肺Ⅱ型上皮细胞EGF、TGFβ1信号通路的影响[J];基础医学与临床;2011年08期

9 邓佳慧;肖军花;王嘉陵;;成年小鼠肺成纤维细胞分离纯化及原代培养[J];基础医学与临床;2012年06期

10 李文斌,常立文,祝华平,王利玲;高氧、维甲酸对胎鼠肺角化细胞生长因子及其受体表达的影响[J];小儿急救医学;2005年01期

中国博士学位论文全文数据库 前7条

1 冉迎春;内皮素-1对高氧暴露早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的影响及其机制研究[D];重庆医科大学;2011年

2 汪圣毅;腺病毒介导hIL-10基因转染联合IFN-γ抑制血管平滑肌细胞增殖及其机制的研究[D];复旦大学;2005年

3 王华;粘着斑激酶活化对早产鼠高氧肺损伤的影响及其信号转导机制研究[D];华中科技大学;2006年

4 兰勇;腺病毒介导的人eNOS基因转染抑制血管平滑肌细胞增殖及其机制的研究[D];复旦大学;2007年

5 钟礼立;HGF对高氧致新生大鼠慢性肺疾病的保护作用及其机制研究[D];中南大学;2007年

6 卢红艳;早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖与转分化的研究[D];华中科技大学;2007年

7 付红敏;CGRP在高氧诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤中的作用及其信号转导途径探讨[D];重庆医科大学;2009年

中国硕士学位论文全文数据库 前9条

1 冯海利;AcSDKP对TGF-β1/JNK通路的调节在大鼠肺成纤维细胞增殖和胶原蛋白合成中的作用[D];华北煤炭医学院;2010年

2 程华;AcSDKP对TGF-β1介导的P38通路调节在大鼠肺成纤维细胞胶原合成中的作用[D];河北联合大学;2011年

3 肖桦;盐酸氨溴索和地塞米松联合应用促进人胎肺Ⅱ型上皮细胞成熟的实验研究[D];中国医科大学;2007年

4 余维涛;特异性Stealth siRNA抑制小鼠肺成纤维细胞TGF-β_1表达的实验研究[D];第三军医大学;2007年

5 丁浩;鼠肺成纤维细胞在细胞外基质支架中生长特性的实验研究[D];江苏大学;2009年

6 张欢;游离二氧化硅粉尘诱转的肺肌成纤维细胞IGF-Ⅱ受体的表达及意义[D];郑州大学;2009年

7 王永星;游离二氧化硅诱导大鼠肺成纤维细胞转分化过程中基因组甲基化水平[D];郑州大学;2012年

8 康庆鑫;IL-17A对肺纤维化中成纤维细胞表型转化的影响及可能机制[D];昆明医科大学;2012年

9 程婷婷;P53在高氧致胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞KGFR表达变化中的作用研究[D];华中科技大学;2013年

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 赵洪文,吕长俊,侯显明,于润江;肺纤维化的肺成纤维细胞生物学特征的实验研究[J];中华结核和呼吸杂志;1997年04期

2 华锋;崔恩海;林勇;;缺氧对肺成纤维细胞表达结缔组织生长因子的影响[J];中国呼吸与危重监护杂志;2006年04期

3 王林梅;夏熙郑;张铁栓;;前列腺素E2对白细胞介素13诱导的肺成纤维细胞转分化的影响[J];中国误诊学杂志;2009年34期

4 胡永斌;曾庆富;冯德云;李翔;彭劲武;;激活蛋白-1调控转化生长因子β_1诱导的人肺成纤维细胞Ⅰ型胶原分泌[J];中南大学学报(医学版);2007年05期

5 曾宪升;于宝丹;任敦强;王君丽;何臣;罗永峰;刘明;郑丽霞;陈敏慧;汪延生;付志萍;徐军;;人骨髓间充质干细胞对非特异性间质性肺炎患者成纤维细胞的影响[J];中国呼吸与危重监护杂志;2011年04期

6 刘志峰,郝理华,张理菁;人巨细胞病毒感染对体外培养肺成纤维细胞中明胶酶的影响[J];中华微生物学和免疫学杂志;2005年07期

7 籍继颖;李素平;李秋营;;肿瘤坏死因子-α对肺成纤维细胞内第二信使物质含量的影响[J];中国职业医学;2005年06期

8 殷静;程真顺;谭维军;张莉;谭秋月;;丹参酮ⅡA磺酸钠对大鼠肺成纤维细胞转化生长因子β_1信号通路的作用[J];武汉大学学报(医学版);2013年05期

9 徐雪;陈海燕;朱小霞;梁敏锐;马彦云;王久存;邹和建;;S100A9对肺成纤维细胞的增殖及活性的影响[J];现代免疫学;2013年01期

10 秦永新;万献尧;陈佰义;;类胰岛素生长因子对人肺成纤维细胞糖代谢及功能的影响[J];中华结核和呼吸杂志;2006年07期

中国重要会议论文全文数据库 前6条

1 程真顺;杨炯;叶燕青;;肥大细胞通过细胞紧密接触影响肺成纤维细胞的增殖、转化[A];中华医学会呼吸病学年会——2013第十四次全国呼吸病学学术会议论文汇编[C];2013年

2 李婷;李旭;余常辉;李维;陈燕;蔡绍曦;孟莹;;血管紧张素Ⅱ对原代肺成纤维细胞迁移和纤维化相关因子表达的影响[A];中华医学会呼吸病学年会——2013第十四次全国呼吸病学学术会议论文汇编[C];2013年

3 丁辉;周凤秋;蔡后荣;周乙华;孟凡青;;转换生长因子-β1对肺成纤维细胞窖蛋白-1与细胞外基质表达的影响[A];中华医学会第三届全国间质性肺病暨弥漫性泛细支气管炎学术会议论文汇编[C];2010年

4 丁辉;曹敏;蔡后荣;;CSD肽对肺成纤维细胞的细胞外基质表达的影响[A];中华医学会第三届全国间质性肺病暨弥漫性泛细支气管炎学术会议论文汇编[C];2010年

5 华锋;崔恩海;王斌;;缺氧对肺成纤维细胞表达CTGF和MMP9的影响[A];2005年浙江省呼吸系病学术年会论文汇编[C];2005年

6 张军;张敬;石红军;李卓权;郭超;;茶多酚抑制镍诱导的人肺成纤维细胞的DNA损伤[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年

中国重要报纸全文数据库 前1条

1 肖伟;特发性肺纤维化的药物治疗[N];中国医药报;2008年

中国博士学位论文全文数据库 前5条

1 皋源;脂多糖诱导肺成纤维细胞表型转变及异常增殖的机制研究[D];苏州大学;2013年

2 郝淑玲;肾上腺髓质素及其受体在肺成纤维细胞中的表达及抗纤维化作用的研究[D];第三军医大学;2012年

3 周生余;凝血酶促人肺成纤维细胞增殖及其机制的研究[D];山东大学;2011年

4 张静;COPD人肺成纤维细胞IL-6、IL-8、弹性蛋白的生成及其炎症调节的研究[D];复旦大学;2010年

5 郭子建;MEKK2参与和调制T淋巴细胞受体信号转导以及皮质激素对人肺成纤维细胞MAPK的作用[D];中国协和医科大学;2003年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 丁浩;鼠肺成纤维细胞在细胞外基质支架中生长特性的实验研究[D];江苏大学;2009年

2 张亚娟;β-catenin蛋白敲除对肺成纤维细胞活性影响的实验研究[D];山西医科大学;2014年

3 于芳;血管活性肠肽对巨噬细胞和成纤维细胞在肺损伤修复中的作用探讨[D];中南大学;2008年

4 解宏权;Rho-Rock在肺成纤维细胞—肌成纤维细胞表型转化中的作用[D];大连医科大学;2007年

5 唐春燕;VIP对LPS应激肺内IL-17及其受体表达的影响与机制[D];中南大学;2010年

6 张光辉;游离SiO_2粉尘体外诱转肺成纤维细胞抑制筛选[D];郑州大学;2010年

7 李婷;Ang(1-7)和AngⅡ通过氧化应激对肺成纤维细胞迁移和肺纤维化的影响及其机制[D];南方医科大学;2014年

8 姚琴;肺成纤维细胞表面Thy-1的表达和表观遗传药物影响下的增殖和分化[D];中国协和医科大学;2009年

9 董丽霞;黄芩素对TGF-β_1体外诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化的影响[D];苏州大学;2013年

10 乔莹莹;TGF-β1 SiRNA对人肺成纤维细胞的干预作用[D];吉林大学;2010年

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本文编号：610841