铀矿尘对肺成纤维细胞合成胶原蛋白影响研究

发布时间：2017-08-06 04:25

  本文关键词：铀矿尘对肺成纤维细胞合成胶原蛋白影响研究

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【摘要】：目的观察铀矿尘对小鼠肺成纤维细胞合成胶原蛋白的影响并探讨其机制。方法①取小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞分为溶剂对照组和染尘组,分别以终浓度为0、120 mg/L的铀矿尘混悬液处理0、2、4、8、16、24和32 h后,收集细胞上清液,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,选择最佳染尘时间,分离制备该时间点的2组细胞上清液作为条件培养液(CM)进行后续实验。②取小鼠肺成纤维细胞L929细胞分为对照组和铀矿尘组,分别予溶剂对照组和染尘组的CM处理0、6、12、18、24、30、36 h后,采用免疫组化法检测细胞内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,ELISA法检测细胞上清液中Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)、III型胶原蛋白(COLⅢ)和羟脯氨酸(HYP)的水平。结果①染尘组RAW264.7细胞上清液中TGF-β1水平从染尘后4 h时间点起开始较溶剂对照组出现有统计学意义的升高(P0.05);在染尘后4~24 h呈随染尘时间的增加而升高的时间-效应关系(P0.05),至染尘后24 h达到峰值。取染尘后24 h时间点的2组细胞上清液作为CM进行后续实验。②相较同时间点对照组,铀矿尘组在经相应CM处理后18~36 h,L929细胞中α-SMA表达水平均上调(P0.05),在CM处理后12~36 h,L929细胞上清液中COLⅠ、COLⅢ和HYP的水平均升高(P0.05),且α-SMA表达水平和COLⅢ、HYP的水平均不同程度地呈现随CM作用时间的增加而升高的时间-效应关系(P0.05)。结论铀矿尘刺激巨噬细胞后可导致细胞分泌TGF-β1增加,继而作用于成纤维细胞,上调α-SMA表达,增加COLⅠ、COLⅢ和HPY合成,可能是铀矿尘致肺纤维化的机制之一。
【作者单位】： 南华大学公共卫生学院预防医学系;
【关键词】： 铀矿尘 肺纤维化 成纤维细胞 巨噬细胞 转化生长因子-β α-平滑肌肌动蛋白 胶原蛋白 羟脯氨酸
【基金】：湖南省教育厅基金(15C1198)
【分类号】：R135.2
【正文快照】： expression,and increase the ColⅠ,ColⅢand HYP synthesis.These might be the important mechanisms of lungfibrosis.铀矿尘属于一种混合型粉尘,其主要成分是游离二氧化硅(Si O2,水平一般为20.00%~80.00%),其次还含有天然铀及其衰变产物如镭、钋和氡等放射性核素[1]。铀

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本文编号：628392