小鼠哮喘模型中IL-25和IL-33对气道结构和功能影响的差异性研究

发布时间：2017-09-08 08:08

  本文关键词：小鼠哮喘模型中IL-25和IL-33对气道结构和功能影响的差异性研究

  更多相关文章： 哮喘 IL-25 IL-33 气道炎症 气道重塑

【摘要】：目的:白细胞介素-25(Interleukin-25,IL-25)和白细胞介素-33(Interleukin-33,IL-33)属于不同的细胞因子家族,均能诱导和促进Th2型气道炎症反应。这两种细胞因子在哮喘发生发展中都起到重要作用,但尚无直接证据证明两者作用的差异性。本实验通过比较IL-25和IL-33诱导的小鼠哮喘样气道炎症反应、气道重塑和气道高反应性等检测指标以明确两者间的差异。方法:建立周期为70天的慢性哮喘小鼠模型,设立(1)生理盐水组(阴性对照组);(2)OVA模型组(阳性对照组);(3)IL-25模型组(实验组);(4)IL-33模型组(实验组)。收集小鼠肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)进行细胞计数和分类计数;采用苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)染色,过碘酸-希夫(periodic acid-schiff,PAS)染色等方法观察气道炎症细胞浸润,黏液分泌等指标的变化。收集小鼠BALF上清,并制作肺组织匀浆,采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测上述样品中Ⅱ型辅助性T细胞(T helper cell type 2,Th2)细胞因子产生水平以及可溶性胶原纤维含量。免疫组化法观察气道平滑肌肥大、增生和新生血管形成情况,行激发试验评估小鼠气道高反应性。并且采用流式细胞术检测肺组织、BALF、纵膈淋巴结、肠系膜淋巴结、脾脏、骨髓和胸腺中固有淋巴样2型细胞(type 2 innate lymphoid cell,ILC2)的表达。结果:1.IL-25和IL-33模型组小鼠BALF中炎症细胞总数和分类计数:IL-25组小鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞计数在36 d达到高峰后,迅速降低;IL-33组小鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞计数在36 d达到高峰后,可持续至54 d,停止给药后细胞数才缓慢降低。2.IL-25和IL-33模型组对小鼠肺组织病理学的改变:实验24~70 d,IL-33组小鼠肺泡壁、肺泡腔、支气管壁及伴行血管周围有大量炎性细胞特别是嗜酸性粒细胞浸润;支气管粘膜皱襞增多、延长,管腔内存有大量黏液性痰栓;气道粘液腺增生,粘蛋白染色成强阳性反应,其炎症改变较IL-25组小鼠更加持久。3.IL-25和IL-33模型组细胞因子和Ig E的表达:IL-25和IL-33单独滴鼻给药,均可引起小鼠肺组织匀浆中Th2型细胞因子及嗜酸性粒细胞趋化因子含量增加,但IL-33的作用更加显著及持久。同时,IL-25和IL-33都不能增加小鼠血清中Ig E的表达水平。4.IL-25和IL-33在小鼠肺组织气道重塑中的作用:实验第48~70 d,IL-25组和IL-33组小鼠肺组织胶原沉积明显,气道平滑肌肥大、增生显著,气道黏膜下新生血管形成明显,较生理盐水组有统计学意义。但是,在实验第70 d,IL-33组小鼠肺组织胶原沉积和血管形成程度都显著高于IL-25组。5.IL-25和IL-33对小鼠气道高反应性的影响:IL-25组和IL-33组小鼠接受乙酰甲胆碱激发后,表现出显著的气道高反应性。但是,与IL-25相比,IL-33诱导的小鼠气道组织阻力的增加更加持久。6.IL-25和IL-33对小鼠不同组织器官中ILC2细胞的影响:IL-25直接滴鼻和IL-33直接滴鼻都可以诱导小鼠肺组织、BALF、纵膈淋巴结、肠系膜淋巴结、脾脏、骨髓中ILC2细胞数目增加,但IL-33滴鼻还可以诱导胸腺组织中ILC2细胞数目的增加,且IL-33的作用更加明显且持久。结论:IL-25和IL-33单独滴鼻都可以引起过敏原非依赖的小鼠气道炎症、气道重塑和气道高反应性以及多组织器官ILC2细胞的增多,但IL-33以低于IL-25 20倍的剂量即可引起相似的改变,且其作用更加明显而持久。因此,深入研究IL-25和IL-33在哮喘发生发展中的作用机制尤为重要,两者作为哮喘干预治疗靶标的探索实验尚需进一步开展。
【关键词】：哮喘 IL-25 IL-33 气道炎症 气道重塑
【学位授予单位】：首都医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R562.25;R-332
【目录】：

• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-15
• 材料与方法15-33
• 实验结果33-63
• 讨论63-69
• 结论69-70
• 参考文献70-77
• 文献综述77-99
• 参考文献90-99
• 附录：英文缩写词表99-102
• 攻读学位期间发表文章情况102-107
• 致谢107-109
• 个人简历109-110

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本文编号：812860