DANCE作为体内外细胞的病理反应及其机制的研究

发布时间：2017-09-19 21:33

  本文关键词：DANCE作为体内外细胞的病理反应及其机制的研究

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【摘要】：目的:我们的前期研究发现,DANCE(Density Alteration in Non-physiological Cells)反应是一种普遍存在的生命现象,包括体外培养的人细胞株、小鼠体内组织细胞、大肠杆菌和白色念珠菌等;本研究以体外培养的细胞/细菌和肾上腺素诱导的小鼠急性肺水肿模型为实验对象,研究病理条件下体内外细胞/细菌发生的DANCE反应及其机制。方法:通过改变体外培养的细胞/细菌的培养条件以及应用药物干预方法,测定细胞/细菌的体外DANCE反应;分别收集正常昆明小鼠的肝脏和肺组织各细胞条带进行HE染色,镜下观察各条带的组分及其组织细胞的形态变化;测定小鼠肝脏和肺组织细胞的DANCE反应;测定小鼠的肺湿重/肺干重比值;制备小鼠肺组织病理切片;应用蒽酮法测定小鼠肝糖原含量;应用Quantitative Real-time PCR测定肾上腺素不同剂量和不同作用时间对小鼠肝脏细胞IL-1β和IL-6的m RNA表达水平的影响;分析各实验结果与小鼠肝脏和肺组织细胞DANCE反应的关系。结果:正常培养的细胞/细菌经DSGC离心后,均可分离出具有不同密度的细胞条带;在培养条件改变和药物的作用下,细胞条带的数目或含量都会发生改变;正常昆明小鼠经HE染色,镜下可见肺和肝脏的组织匀浆各DSGC分离条带主要由细胞团和组织碎片组成;小鼠肝脏和肺细胞发生DANCE-DOWN反应,且这种DANCE反应对肾上腺素的给药剂量和作用时间具有明显的依赖性;肺的DANCE反应概率在给药2小时和6小时出现两个高峰,而肝脏则在1小时和8小时出现两个高峰;小鼠肺组织细胞的DANCE反应概率和肺湿重/肺干重比值之间具有明显的相关性;肺组织细胞发生DANCE反应的小鼠,镜下可见其肺组织切片中有明显的血细胞积聚现象;急性肺水肿小鼠肝糖原含量在给药1小时出现一个低谷,但在8小时出现一个高峰;肝脏细胞中IL-1β和IL-6的m RNA相对表达量与肝脏组织细胞的DANCE反应概率具有明显的相关性,在注射肾上腺素1小时后达到高峰。结论:体外细胞和细菌/真菌在培养条件改变或药物作用下可发生DANCE反应,是细胞和细菌/真菌发生病理生理变化的一种反映;肾上腺素所致急性肺水肿可引起小鼠肝和肺组织细胞的DANCE反应,其反应概率与药物剂量和作用时间有关,且伴有肝脏细胞IL-1β和IL-6的m RNA水平升高,因此,肝和肺组织细胞的这种DANCE改变是机体对肾上腺素所致急性肺水肿的一种病理反应。由肾上腺素引起的,细胞因子介导的体内应激性炎症性反应、肝脏细胞代谢(如糖原代谢)模式改变、肺内压过高造成肺组织细胞受挤压、肺循环异常造成肺组织“淤血”等病理变化,可能是导致这种体内DANCE反应的机制。
【关键词】：DANCE 急性肺水肿 肾上腺素 DSGC
【学位授予单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R563
【目录】：

• 摘要3-5
• Abstract5-9
• 绪论9-15
• 第一章 实验材料与方法15-33
• 1.1 实验材料15-19
• 1.1.1 实验细胞、细菌与真菌15
• 1.1.2 实验动物15
• 1.1.3 试剂及耗材15-17
• 1.1.4 实验仪器17-18
• 1.1.5 试剂配制18-19
• 1.1.6 引物序列19
• 1.2 实验方法19-33
• 1.2.1 K562 细胞的DANCE反应19-21
• 1.2.2 E.coli BL21 DANCE的DSGC实验21-22
• 1.2.3 ATCC10231 的DSGC实验22-24
• 1.2.4 急性肺水肿小鼠的DANCE反应研究24-28
• 1.2.5 小鼠肺湿重/肺干重比值的测定28
• 1.2.6 小鼠肝糖原含量的测定28-29
• 1.2.7 小鼠肝脏中IL-1bate、IL-6 基因表达量的检测29-32
• 1.2.8 统计学处理32-33
• 第二章 实验结果与分析33-55
• 2.1 体外细胞和细菌实验结果33-39
• 2.1.1 新复苏K562 细胞在不同培养基和相同密度梯度条件下DANCE变化的比较分析33
• 2.1.2 老的K562 细胞在不同培养基和相同密度梯度条件下DANCE变化的比较分析33-34
• 2.1.3 不同血清培养的K562 细胞的DANCE反应和生长曲线34-35
• 2.1.4 反式维甲酸A（VA）对不同培养状态的K562 细胞DANCE反应影响35-36
• 2.1.5 不同培养时间E. coli BL21 的DNACE反应36-37
• 2.1.6 氨苄青霉素引起E. coli BL21 的DNACE反应37
• 2.1.7 不同培养时间真菌ATCC10231 的DANCE反应37-38
• 2.1.8 不同培养密度ATCC10231 的DANCE反应38
• 2.1.9 酮康唑所致真菌ATCC10231 的DANCE反应38-39
• 2.2 体内细胞DANCE反应实验结果39-55
• 2.2.1 小鼠肝脏细胞与肺细胞HE染色39-42
• 2.2.2 急性肺水肿小鼠肺细胞的DANCE反应42-43
• 2.2.3 急性肺水肿小鼠组织学评价及与DANCE反应的关系43-44
• 2.2.4 注射肾上腺素后各组小鼠肺湿重/肺干重比值的比较分析44-45
• 2.2.5 注射肾上腺素后各组小鼠肺细胞的DANCE反应与肺湿重/肺干重比值的关系45-47
• 2.2.6 急性肺水肿小鼠肝脏细胞的DANCE反应47-48
• 2.2.7 注射肾上腺素后各组小鼠肝糖原含量的比较分析。48-49
• 2.2.8 注射肾上腺素后各组小鼠肝脏的DANCE反应概率与肝糖原含量的关系49-51
• 2.2.9 注射肾上腺素后各组小鼠肝脏中IL-1β 和IL-6 的mRNA含量的比较分析51-53
• 2.2.10 注射肾上腺素后各组小鼠肝脏DANCE反应概率与IL-1β、IL-6 mRNA含量的关系53-55
• 第三章 讨论55-58
• 第四章 全文总结58-60
• 4.1 本文主要结论58
• 4.2 创新之处58-59
• 4.3 不足与展望59-60
• 参考文献60-63
• 英文缩略词（Abbreviation）63-64
• 在校期间发表论文64-65
• 致谢65

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

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本文编号：884046