C-8神经酰胺对肺泡Ⅱ型上皮细胞通透性及紧密连接蛋白的影响

发布时间：2017-09-23 15:28

  本文关键词：C-8神经酰胺对肺泡Ⅱ型上皮细胞通透性及紧密连接蛋白的影响

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【摘要】：目的研究外源性C-8神经酰胺对肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)单层通透性的影响,探讨其作用机制。方法将体外分离培养的AECⅡ通过差速贴壁法纯化,在Transwell上构建单层,待细胞融合后给予不同浓度的C-8神经酰胺(0、25、50、100μmol/L)继续培养24 h,应用伏欧计测定跨上皮电阻值(TEER)及辣根过氧化物酶(HRP)标记法检测吸光度(OD)值;分别提取细胞总蛋白及总RNA,采用Western blot和实时定量聚合酶链式反应方法检测不同浓度的C-8神经酰胺对AECⅡ紧密连接蛋白ZO-1和Occludin蛋白水平和mRNA水平表达的影响。结果不同浓度的C-8神经酰胺刺激融合的AECⅡ单层24 h后,各组间TEER值、OD值差异均有统计学意义(F=38.780、19.780,P0.001)。C-8神经酰胺作用后,ZO-1、Occludin蛋白(F=71.150,P0.01;F=7.703,P=0.002)及mRNA(F=4.887,P=0.014;F=3.637,P=0.048)表达量明显降低。结论 C-8神经酰胺可能通过下调紧密连接蛋白的表达增加肺泡Ⅱ型上皮细胞通透性。
【作者单位】： 安徽医科大学第二附属医院呼吸内科;安徽医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系;
【关键词】： 神经酰胺 紧密连接 肺上皮细胞 跨上皮电阻
【基金】：国家自然科学基金(编号:81400058) 安徽省自然科学基金项目(编号:1208085QH165)
【分类号】：R563.8
【正文快照】： 2015-11-23接收急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distresssyndrome,ARDS)最显著的病理学变化是弥漫性肺泡上皮细胞损伤,包括肺泡上皮屏障、肺泡水清除、肺泡表面活性物质的分泌等[1]。其中肺泡上皮屏障损伤是ARDS发病环节中的重要一步,而肺泡上皮屏障发挥选择性通透作用

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本文编号：906035