人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor的基因克隆与序列分析

发布时间：2017-10-09 19:35

  本文关键词：人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor的基因克隆与序列分析

  更多相关文章： 丝氨酸蛋白酶抑制因子 Hespintor 逆转录PCR 基因克隆 生物信息学

【摘要】：目的:克隆得到人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor基因,并应用生物信息学方法进行序列分析。方法:提取HepG2细胞总RNA,RT-PCR扩增Hespintor基因片段,连接至pMD 20-T克隆载体中,转化JM109宿主菌,蓝白斑法筛选阳性克隆菌落,菌落PCR及测序鉴定。利用在线工具软件对Hespintor进行信号肽预测、亚细胞定位、结构域、三级结构、基因染色体定位及组织分布表达分析。结果:人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor基因全长285bp,共编码94aa,其中1-23aa编码信号肽,符合亚细胞定位于细胞外的预测;53-93aa编码一个典型的Kazal结构域。Hespintor基因的染色体定位于5号染色体短臂3区3带1亚带(5q33.1);正常组织中仅在睾丸有表达,而肿瘤组织中仅在生殖细胞瘤有表达。结论:Hespintor是一个在机体中静止表达的Ka-zal型丝氨酸蛋白酶抑制因子家族的分泌型新成员。
【作者单位】： 大连大学医学院辽宁省高校生物物理学重点实验室;大连大学生命科学与技术学院;
【关键词】： 丝氨酸蛋白酶抑制因子 Hespintor 逆转录PCR 基因克隆 生物信息学
【基金】：大连市科技计划项目(“基因重组人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor抗肝细胞癌的药效学研究”,编号:2010E13SF138)资助~~
【分类号】：R346
【正文快照】： 0引言Hespintor是利用抑制性差减扣除杂交技术研究乙型肝炎病毒DNA聚合酶反式调节作用,从人肝母细胞瘤HepG2细胞中筛选得到的一未知功能新基因,经Real Time PCR验证后,结合生物信息学方法确定该基因是一种新的Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子(serine proteinase inhibitor,SERPIN

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本文编号：1002036