大鼠骨髓源性内皮祖细胞的体外分离、培养及鉴定

发布时间：2017-10-10 10:09

  本文关键词：大鼠骨髓源性内皮祖细胞的体外分离、培养及鉴定

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【摘要】：目的:体外分离、扩增培养大鼠骨髓源性内皮祖细胞,并进行生物学特性鉴定,为后续实验研究提供材料准备。方法:采用密度梯度离心法和差速贴壁法分离获得单个核细胞,置于特殊培养基EGM-2MV进行扩增培养,对细胞行免疫荧光法检测CD34、CD133、VEGFR2的表达情况,摄取DiI-ac-LDL、结合FITC-UEA-1双染色鉴定及细胞迁移实验。结果:刚分离的单个核细胞小而圆,诱导培养4d左右细胞开始变大,部分呈梭形或多角形,2周左右呈条索状排列;细胞免疫荧光法鉴定CD34、CD133、VEGFR2为阳性,细胞既能吞噬DiI-ac-LDL又能与FITC-UEA-1结合;细胞迁移实验可见每个视野迁移细胞数为(16.6±1.05)个。结论:通过密度梯度离心法和差速贴壁法能成功获取单个核细胞,在特定培养基EGM-2MV中培养后可分化成为内皮祖细胞,为后续实验提供了细胞来源。
【作者单位】： 重庆医科大学附属第二医院超声影像学研究所;
【关键词】： 皮祖细胞 体外分离 密度离心法
【基金】：重庆市教委科学技术研究项目(KJ110320)
【分类号】：R329
【正文快照】： 内皮祖细胞(EPCs)是一种能够直接分化成为血管内皮细胞的前体细胞,在损伤、缺血及药物等因素的刺激下均可以动员骨髓中的EPCs进入体循环并在各种趋化因子作用下逐步募集到缺血或者损伤处分化成成熟的内皮细胞,促进缺血组织器官的内皮细胞修复及恢复血供11-42。所以,EPCs已经越

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本文编号：1005751