培养条件对小鼠髓源性树突状细胞生物特性影响的观察

发布时间：2017-10-10 12:13

  本文关键词：培养条件对小鼠髓源性树突状细胞生物特性影响的观察

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【摘要】：目的:明确GM-CSF浓度、IL-4及细胞起始培养密度对培养的小鼠髓源性DC生物特性的影响。方法:分离小鼠骨髓细胞,用100、20和2ng/mL GM-CSF联合或不联合IL-4以及起始细胞培养密度为2.5×105和7.5×105 mL-1进行体外诱导DC细胞培养,培养7d后收集细胞进行计数,同时用流式细胞仪检测CD11c+及CD11c+CD80+细胞的比例,并对GM-CSF联合或不联合IL-4培养的DC细胞吞噬肿瘤细胞的能力进行检测。此外以混合淋巴细胞反应(MLR)检测培养的DC细胞对淋巴细胞的剌激能力。结果:2ng/mL GM-CSF扩增的DC细胞为起始培养细胞浓度的0.21±0.05倍,与100ng/mL的0.52±0.10倍(t=10.311,P0.001)及20ng/mL的0.46±0.04倍(t=6.934,P0.001)差异均有统计学意义,但100ng/mL与20ng/mL组之间差异无统计学意义,t=1.333,P=0.152。此外,100ng/mL GM-CSF组CD11c细胞的比例低于低2ng/mL组,t=2.571,P=0.034;但100ng/mL与20ng/mL组差异无统计学意义,t=0.913,P=0.39。在20ng/mL GM-CSF时,IL-4的加入与否对培养的DC细胞扩增、纯度、成熟、吞噬及活化淋巴细胞的能力均无影响,起始培养细胞密度可影响细胞的扩增。结论:小鼠髓源DC细胞的培养中,GM-CSF浓度对细胞的扩增及成熟均很重要,高浓度GM-CSF有利于DC的扩增及成熟,而在GM-CSF为20ng/mL时,IL-4对DC细胞的培养并不是必需的。
【作者单位】： 湖北文理学院医学院附属医院肿瘤中心;
【关键词】： 树突状细胞 骨髓 细胞因子 动物 实验
【基金】：湖北省卫生厅青年科技人才项目(QJX2012-40)
【分类号】：R329
【正文快照】： 树突状细胞(dendritic cell,DC)是体内最有效的专职抗原提呈细胞,在机体免疫调节中发挥极为重要的作用,不仅具有免疫剌激作用,还可通过活化诱导免疫抑制性T细胞在维持外周免疫耐受中发挥重要的作用[1-2]。DC治疗方法的研究为肿瘤治疗及器官移植等提供了新的研究领域[3]。小鼠

【参考文献】

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6 张罕;吕U，

本文编号：1006316