基于RTB的新型免疫增强剂构建、表达及免疫效果评估

发布时间：2017-10-12 02:14

  本文关键词：基于RTB的新型免疫增强剂构建、表达及免疫效果评估

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【摘要】：目的利用自主知识产权抗体3E1,确定蓖麻毒素B链与细胞特异性结合的活性肽部位,通过构建含肽的绿色荧光蛋白原核表达载体,实现含肽的绿色荧光蛋白在大肠杆菌中的高效、可溶性表达,评价小鼠舌下口服含蓖麻毒素B链肽的绿色荧光蛋白后黏膜免疫应答的能力。方法用生物信息学技术,确定蓖麻毒素B链与细胞特异性结合的活性肽部位;分子克隆技术构建含不同肽的绿色荧光蛋白原核表达载体;镍金属离子鏊合柱纯化目的蛋白;间接ELISA测定小鼠舌下口服不同肽-GFP融合蛋白后各种抗体水平的变化。结果实现了含不同肽的GFP在大肠杆菌中的高效、可溶性表达,获得了纯度大于90%的肽-GFP融合蛋白。免疫小鼠后,小鼠血清中均检测到了较高水平的IgG抗体,其中的P1肽-GFP融合蛋白免疫小鼠血清中检测到了较高水平的IgG2a和IgM抗体。免疫组血清中IgG2b、IgG3、IgA水平与对照组无明显差异。结论分别用4个小分子肽-GFP融合蛋白免疫小鼠后,小鼠血清中均检测到了较高水平的IgG抗体,其中的P1肽-GFP融合蛋白免疫小鼠的血清中检测到了较高水平的IgG2a和IgM抗体,激发了Th1型免疫应答。
【作者单位】： 海军总医院检验科;海军总医院眼科;军事医学科学院基础研究所;
【关键词】： 蓖麻毒素B链 黏膜免疫 小分子肽 Th型免疫应答
【基金】：国家自然科学基金(30872394)
【分类号】：R392.12
【正文快照】： 黏膜免疫可诱导局部黏膜产生分泌性保护性抗体,并诱导其它部位产生sIgA和全身体液免疫应答,同时,黏膜免疫还诱导黏膜及全身CTL反应,并产生分泌IFN-γ的CD4+T细胞[1],在疫苗研究中具有重要意义。由于目前黏膜免疫中使用抗原的免疫原性普遍较弱,使基于黏膜免疫疫苗诱导的免疫应

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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【相似文献】

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1 陈U，

本文编号：1016070