利用人免疫球蛋白构建免疫磁珠富集金葡菌条件优化

发布时间：2017-10-13 00:18

  本文关键词：利用人免疫球蛋白构建免疫磁珠富集金葡菌条件优化

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【摘要】：利用人免疫球蛋白制备富集金黄色葡萄球菌的免疫磁珠及优化条件;利用化学键法制备免疫磁珠,并用矩阵法和单因素法优化免疫磁珠制备条件,通过磁珠对抗体饱和吸附量及加入量相关性评价磁珠与抗体固定化程度,根据免疫磁珠的特异性、灵敏性及饱和捕捉量来考察IMBS.aureus对金葡菌的富集能力;结果显示采用MB-M型磁珠,加入质量浓度均为5 mg/L的活化剂EDC和NHS,于24℃偶联人IgG,24 h得到IMBS.aureus,其饱和吸附量为393.27μg,磁珠与人IgG加入量具有相关性,IMBS.aureus特异性好、灵敏度高(26 CFU/10 mL),0.2 mL IMBS.aureus饱和捕捉菌液浓度为106CFU/mL;通过优化,磁珠装载人IgG分子的能力提高了5倍,检测限提高了4倍,富集金葡菌的效率大大增强,成本降低,为人免疫球蛋白磁珠富集和分离金黄色葡萄球菌实际应用创造了条件。
【作者单位】： 广东海洋大学食品科技学院;国家海产品质量监督检验中心;渤海大学化学化工与食品安全学院;
【关键词】： 金黄色葡萄球菌 免疫磁法 人免疫球蛋白 富集
【基金】：国家自然科学基金项目(30972287) 国家“十二五”支撑计划项目(2012BAD29B06) 广东省教育厅及广东海洋大学引进人才基金项目(0812311) 广东省科技厅省部级产学研项目(2011B090400154)
【分类号】：R378
【正文快照】： 金黄色葡萄球菌(简称“金葡菌”)可在各种恶劣环境下生长,并极易产生毒素(最低致病剂量为1μg/kg[1-3])。虽然目前检测金葡菌的方法较多,但是由于常规检测方法在菌浓度较低时易造成漏检,多数免疫学方法操作复杂,而灵敏度和准确性较好的分子学方法价格昂贵,需专业人员操作[4-5

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本文编号：1021766