UCHLl对TrkB的去泛素化调节及其在学习记忆中的作用

发布时间：2017-10-16 03:40

  本文关键词：UCHLl对TrkB的去泛素化调节及其在学习记忆中的作用

  更多相关文章： TrkB UCHL1 泛素化 膜受体 信号转导

【摘要】：一、研究目的和背景脑源性神经营养因子BDNF通过受体酪氨酸激酶B(TrkB)在调控神经元存活、生长发育、突触可塑性等方面发挥重要作用[1],而TrkB的翻译后修饰直接影响其生物学功能的发挥。已知TrkB可被泛素化[2],但是其调控分子和功能尚不清楚。UCHL1属泛素羧基水解酶家族,在脑中含量丰富,已有报道UCHL1参与神经元突触可塑性的调控[3]。我们前期质谱分析发现UCHL1可与TrkB结合,提示UCHL1可能参与调控TrkB。本课题主要对UCHL1是否调控TrkB去泛素化及其生物学功能进行深入研究。二、实验方法为研究UCHL1对TrkB去泛素化调节及对其生物学功能的影响,我们通过构建UCHL1或TrkB相关质粒,免疫共沉淀分析UCHL1与TrkB的相互作用及UCHL1对TrkB泛素化的调节。通过免疫荧光定量分析、膜表面可裂解生物素检测TrkB受体分布及内吞和再循环等实验,分析UCHL1对TrkB去泛素化调控对TrkB内吞、再循环的影响。我们还通过contextual fear conditioning (CFC)旷场(open field)分析UCHL1对TrkB去泛素化调控在小鼠学习记忆和运动能力中的作用。三、实验结果1. TrkB与UCHL1有相互作用免疫共沉淀实验(co-immunoprecipiTATion, CO-IP)证明TrkB-FL与T1均可与UCHL1相互作用。进一步利用Co-IP,发现TrkB中JM1区和UCHL1中75-85氨基酸是两者结合的必要和充分条件。2. UCHL1调控TrkB的去泛素化过程通过P4D1及FK1抗体检测,我们发现TrkB主要为多个位点单泛素化。通过过表达、干扰UCHL1以及体外去泛素化检测等验证UCHL1可调节TrkB的去泛素化,并且主要调控488位点的去泛素化。3. UCHL1参与调控膜表面TrkB内吞以及内吞之后的转运过程TAT-UCHL175-85多肽可通过抑制UCHL1与TrkB-FL的结合进而促进BDNF诱导的TrkB泛素化,进而促进膜表面TrkB的内吞,而内吞之后的再循环TrkB减少,更多TrkB内吞后降解,最终使得TrkB及其下游信号通路受到抑制。4. TAT-UCHL1 75-85可通过抑制UCHL1与TrkB的结合降低C57小鼠的学习记忆能力通过CFC测试实验发现体内注射TAT-UCHL1 75-85小鼠CFC过程中获得受损。四、结论我们发现UCHL1可通过与TrkB-FL相互作用调节TrkB的去泛素化,并影响其BDNF诱导的膜表面TrkB的内吞以及内吞之后的降解和再循环过程,从而影响BDNF-TrkB下游信号通路,进而影响小鼠的学习记忆能力。
【关键词】：TrkB UCHL1 泛素化 膜受体 信号转导
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R338.64
【目录】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 符号说明10-11
• 前言11-14
• 实验材料14-21
• 实验方法21-32
• 实验结果32-48
• 讨论48-51
• 参考文献51-55
• 致谢55-56
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录56-57
• 学位论文评阅及答辩情况表57

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 张富兴,黎振航,李金莲,岑国欣 ,陈应城;Effects of different fixatives on the TrkB-immunoreactivity in rat brain[J];Journal of Medical Colleges of PLA;2003年05期

2 赖红,赵海花,曾亮,吕永利;老龄海马的BDNF及TrkB mRNA表达与学习记忆的关系[J];解剖科学进展;2004年04期

3 师社会;宁晓霞;;BDNF及受体TrkB在大鼠小脑的表达研究[J];实用医技杂志;2007年09期

4 李潇;防治癫痫的新药靶BDNF受体TrkB[J];中国生物化学与分子生物学报;2005年01期

5 林艳丽;脑源性神经营养因子研究进展[J];生物技术通讯;2003年03期

6 ;[J];;年期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 Qin Ou;Lina Liu;Guiming Zhu;Jinhua Piao;Didi Wang;;Effect of Nanometer preparation of dogwood on the BDNF/TrkB pathway of aging model rats induced by D-galactose[A];生命的分子机器及其调控网络——2012年全国生物化学与分子生物学学术大会摘要集[C];2012年

2 姜佳美;周成芳;王春燕;唐小卿;;BDNF-TrkB pathway mediates the protection of hydrogen sulfide against formaldehyde-induced neurotoxicity by downregulation of ALDH2[A];湖南省生理科学会2013年度学术年会论文摘要汇编[C];2013年

3 赖红;赵海花;曾亮;吕永利;;老龄海马的BDNF及TrkB mRNA表达与学习记忆的关系[A];中国解剖学会第八届组织学与胚胎学专业青年研讨会论文集[C];2004年

4 曲静;陈畅;;组织转谷氨酰胺酶(tTG)抑制神经营养因子受体TrkB的降解[A];第十次中国生物物理学术大会论文摘要集[C];2006年

5 陈畅;;tTG在SH-SY5Y细胞分化中对TrkB的调控作用[A];中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会论文摘要集[C];2005年

6 陈畅;;tTG在SH-SY5Y细胞分化中对TrkB的调控作用[A];第一届全国脑与认知科学学术研讨会论文集[C];2005年

7 李玲;祝明洁;陈峰;刘英;孙佳明;连娣;;TrkB受体对BDNF辅佐治疗肺炎链球菌脑膜炎后的反应[A];中华医学会第十七次全国儿科学术大会论文汇编（上册）[C];2012年

8 陈金兰;陈燕惠;陈珊;王勇;;早期环境对BDNF及其受体TrkB表达和脑发育的影响[A];中华医学会第十七次全国儿科学术大会论文汇编（下册）[C];2012年

9 邓颖;张春虎;胡随瑜;张海男;黄熙;范荣;王杨;;柴胡疏肝散对抑郁模型大鼠海马、杏仁核、额叶BDNF及其受体TrkB的影响[A];第六届全国中西医结合基础理论研究学术研讨会暨第二届湖南省中西医结合学会肝病专业学术年会论文集[C];2010年

10 张春虎;邓颖;胡随瑜;张海男;程田力;;柴胡疏肝散对抑郁模型大鼠海马、杏仁核、额叶BDNF及其受体TrkB的影响[A];中国中西医结合学会精神疾病专业委员会第十届学术会议论文集[C];2010年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 姜虹;酪氨酸激酶受体B在冠心病中的作用及机制研究[D];山东大学;2015年

2 孔淑贞;GABA递质系统和BDNF-TrkB通路下调及cofilinrod形成在癫痫发作中的作用机制研究[D];复旦大学;2014年

3 杨海丽;脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体(TrkB)对小鼠体重和能量消耗的调控作用[D];西北农林科技大学;2016年

4 赵玲;神经元活性调控TrkB受体细胞膜表面插入机制的研究[D];山东大学;2009年

5 范萌;受体型酪氨酸激酶TrkB通过抗脱落凋亡作用参与结肠癌转移的分子机制研究[D];第四军医大学;2014年

6 段珊;JIP 3介导TrkB受体顺轴突转运及增强BDNF引发的信号通路激活的功能研究[D];山东大学;2011年

7 李学智;RET和TrkB在神经元膜表面分布水平不同以及神经元活性依赖的RET膜表面插入的机制研究[D];山东大学;2012年

8 周柳青;大鼠单侧迷路切除术后BDNF-TrkB信号在小脑前庭通路中变化的研究[D];华中科技大学;2013年

9 温文胜;TrkB在鼻咽癌浸润转移中的作用和机制研究[D];广西医科大学;2007年

10 于晓辉;TrkB介导的失巢凋亡抑制与卵巢癌的转移和耐药[D];上海交通大学;2007年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 张中伟;丰富环境对HIBD大鼠学习记忆能力及海马CA1区TrkB、p-Akt的影响[D];黑龙江中医药大学;2016年

2 郭云云;UCHLl对TrkB的去泛素化调节及其在学习记忆中的作用[D];山东大学;2016年

3 陈斯韵;BDNF-TrkB通路对心脏微血管内皮细胞的影响[D];暨南大学;2010年

4 王珏;神经元活性对TrkB受体再循环的调节作用及其机制研究[D];山东大学;2012年

5 盛爱丽;神经元细胞膜表面TrkB受体免疫荧光定量分析方法的建立[D];山东大学;2009年

6 隋文海;神经元中Myo5a介导TrkB受体再循环运输的研究[D];山东大学;2014年

7 刘挺;A549细胞中TrkB激活的调控机制研究[D];山东大学;2015年

8 李娜;CPE参与调控海马神经元活性依赖性TrkB受体胞内运输[D];山东大学;2012年

9 刘祥华;Dynamin1磷酸化介导的TrkB内吞在阿尔兹海默症中的保护作用及其机制研究[D];山东大学;2014年

10 李满红;SIRT1通过BDNF-TrkB通路介导硫化氢抗同型半胱氨酸诱导的认知功能损伤[D];南华大学;2014年

，

本文编号：1040417